溶血葡萄球菌染料法荧光定量PCR试剂盒

溶血葡萄球菌染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品用途

专用于溶血葡萄球菌（Staphylococcus haemolyticus）的核酸定性或定量检测，仅供科研使用。

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

产品特点

高特异性：基于溶血葡萄球菌保守基因序列设计引物，无交叉反应。

灵敏度：

检测下限为几百拷贝/反应。

操作便捷：

即开即用，含预混PCR试剂（含染料）、引物及阳性对照（非活体DNA片段）。

一管式反应设计（RT-PCR与扩增同步），减少污染风险。

兼容性：需自备DNA模板及10×ROX（依机型需求）。

试剂盒组成

（以通蔚生物为例，具体成分可能因差异调整）

PCR预混液（含荧光染料、dNTPs、聚合酶等）

引物混合液（特异性靶向溶血葡萄球菌）

阳性对照（1×10^8拷贝/μL，需稀释使用）

超纯水（用于稀释或空白对照）

说明书（含标准曲线绘制方法及阈值设定）。

操作步骤

样本处理：提取待测样本DNA，建议浓度≥100 ng/μL。

阳性对照稀释：

按10倍梯度稀释阳性对照（10^2–10^7拷贝/μL），独立操作避免污染。

PCR反应体系配制：

每20μL反应体系含预混液、引物、模板DNA及ROX（如需）。

上机检测：

按仪器说明书设置程序：95℃预变性→循环扩增（95℃ 10s，60℃ 30s，40循环）。

数据分析

定量检测：

以阳性对照log值为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线，计算样本浓度。

定性检测：

阴性：Ct≥40；阳性：Ct≤35；35<Ct<40需复测。

阳性对照Ct≤30，阴性对照Ct≥40为有效实验。

注意事项

分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区），避免交叉污染。

阳性对照需单独存放，严禁反复冻融。

实验废弃物需按生物安全标准处理。

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