鲤疱疹病毒通用染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

检验原理

本试剂盒采用SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术，针对鲤疱疹病毒（KHV）保守基因区域设计特异性引物，通过荧光信号实时监测核酸扩增过程，实现定性或定量检测。

试剂组成

KHV扩增液：50μL ×1管

KHV反应液：950μL ×1管

KHV阳性质控品（1×10^8拷贝/μL）：50μL ×1管

KHV阴性质控品：50μL ×1管

荧光PCR专用模板稀释液：1mL ×1瓶

说明书：1份

注意：不同批号试剂不可混用，组分数量满足标称检测次数。

储存条件及有效期

-20℃避光保存，避免反复冻融（≤7次），有效期12个月。

适用仪器

兼容ABI系列、MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等荧光定量PCR仪。

自备耗材

无DNA/RNA酶的1.5mL离心管、0.2mL PCR管

滤芯吸头（10μL、200μL、1000μL）

离心机、振荡器、移液器

样品要求

样本类型：胃液分泌物、呕吐物或培养物（参照《临床微生物样本采集规范》）。

保存条件：短期-20℃，长期-70℃（≤6个月），运输需2~8℃冰袋。

使用方法

样品处理：按规范提取核酸，避免交叉污染。

阳性对照稀释：

将阳性质控品（1×10^8拷贝/μL）按10倍梯度稀释至10^2~10^7拷贝/μL，用于标准曲线制备。

PCR反应体系：

每20μL反应体系含：2×qPCR MagicMix、引物混合物、模板DNA。

程序设置：

预变性：95℃ 5分钟；扩增：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（40循环），信号采集于延伸阶段。

数据分析

定量检测：以阳性对照log值为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线，推算样品浓度。

定性检测：

阴性对照Ct≥40；阳性对照Ct≤30且呈典型扩增曲线。

样品Ct≤35为阳性，≥40为阴性；35<Ct<40需复测。

注意事项

仅限科研使用，不可用于临床诊断。

操作时需穿戴实验服、口罩及手套，避免污染。

阳性对照稀释需在独立区域进行，防止污染其他组分。

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