平尾毛细线虫染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

产品概述

本试剂盒基于实时荧光定量PCR技术，专为检测平尾毛细线虫核酸设计，具有高灵敏度和特异性。适用于科研领域（不可用于临床诊断），可检测粪便、组织匀浆液及环境样本等，检测限低至10拷贝/μL，2小时内完成检测。

产品组成

2×qPCR MagicMix（棕色管，500μL）：预混PCR反应液，含荧光染料。

荧光PCR专用模板稀释液（黄盖，1mL）：用于标准品及样品稀释。

平尾毛细线虫PCR引物混合物（白盖，100μL）：特异性引物及探针。

阳性对照（冻干DNA片段）：浓度为1×10^8拷贝/μL，需稀释后使用。

规格：50次20μL反应体系。

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

操作步骤

样品前处理

粪便/组织样本：取0.1g样本加入1mL生理盐水匀浆，离心取上清。

血液样本：EDTA抗凝血2mL，提取血浆或白细胞层RNA。

环境样本：过滤浓缩后提取核酸。

标准品稀释（以10^2-10^7拷贝/μL梯度为例）

标记6管（7-2号），每管加45μL稀释液。

7号管加5μL阳性对照（1×10^8拷贝/μL），震荡混匀得10^7拷贝/μL。

依次梯度稀释至10^2拷贝/μL（换枪头避免污染）。

PCR反应体系

| 成分 | 体积（μL） |

| 2×qPCR MagicMix | 10 |

| 引物混合物 | 2 |

| 模板DNA/标准品 | 2 |

| RNase-free水 | 补至20 |

循环条件：

95℃ 5min（预变性）→ 95℃ 15s → 60℃ 30s（40循环，荧光采集）。

注意事项

标准品稀释需在独立区域操作，避免污染。

反应体系配制需在冰上进行，防止酶失活。

阳性对照为DNA片段，不含活体病原，按生物安全规范处置废弃物。

结果判读

Ct值≤35：样本阳性。

Ct值＞35或无扩增：阴性（需复检或重新采样）。

性能参数

灵敏度：10拷贝/μL。

特异性：与常见寄生虫无交叉反应。

重复性：CV＜5%。

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