乙型肝炎病毒B型染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

产品基本信息

用途：基于探针法荧光定量PCR原理，定性或定量检测样本中乙型肝炎病毒（HBV）B型DNA，线性范围至少5个数量级，分析灵敏度可达100拷贝/反应。

适用性：仅用于科研，不可用于临床诊断，适配ABI、Bio-Rad等主流荧光定量PCR仪。

规格组成：含PCR反应液、阳性对照（1×10⁸拷贝/μL）、引物混合物等，足够50次20μL体系反应。

操作流程

DNA提取 自选方法纯化样品DNA，与多数核酸提取试剂盒兼容。 样本制备区独立操作，避免交叉污染。

标准曲线稀释 1. 6个离心管标记2-7号，各加45μL DEPC-H₂O；

2. 7号管加5μL阳性对照（1×10⁸拷贝/μL），梯度稀释至1×10²拷贝/μL 。 使用带芯枪头，稀释操作需在独立区域进行，防止污染试剂。

试剂配制 按N+2（样品+阴性对照+6个阳性对照）准备qPCR管，添加反应试剂（具体成分需见说明书）。 试剂准备区操作，严格按比例混合。

模板添加 每管加2μL模板，顺序为阴性对照→待测样品→阳性对照，离心30秒。 加样后立即进行扩增，避免反复冻融。

扩增反应 PCR程序需参考说明书（如95℃预变性、40 cycles扩增等）。 仪器样品槽需对应标记，确保结果准确。

结果分析规则

定量检测：以阳性对照浓度log值为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线，推算样品DNA浓度。

定性检测：阴性对照Ct值≥38或无Ct值；阳性对照Ct值<38且有明显扩增曲线；待测样品Ct值<38判定为阳性。

污染排查：阴性对照出现扩增曲线提示污染，需重新实验。

运输与保存要求

运输：低温运输，避免反复冻融。

保存：-20℃避光保存，有效期1年，阳性对照需单独存放以防污染其他试剂。

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