犬巴贝斯虫染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

犬巴贝斯虫染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

预期用途

本试剂盒基于实时荧光PCR技术，定性检测犬巴贝斯虫（Babesia canis）基因组，适用于临床样本（如全血、组织）中巴贝斯虫感染的诊断及疗效监测，为寄生虫病提供分子生物学检测依据。

检验原理

针对犬巴贝斯虫基因组保守区域设计特异性引物和探针，通过PCR扩增靶序列并释放荧光信号。

利用荧光定量PCR仪实时监测荧光强度，通过扩增曲线判定样本中是否存在巴贝斯虫核酸。

主要组成成分

| 组分 | 25T/盒规格 | 50T/盒规格 |

| PCR反应液 | 500 μL×1管 | 1000 μL×1管 |

| 阴性对照（灭菌纯水）| 40 μL×1管 | 40 μL×1管 |

| 阳性对照（含靶基因质粒）| 40 μL×1管 | 40 μL×1管 |

| 说明书 | 1份 | 1份 |

操作步骤

样本制备：提取待测RNA，避免降解。

标准曲线配制：

将阳性对照按10倍梯度稀释（10²~10⁷拷贝/μL），独立分区操作以防污染。

反应体系配制（20 μL/反应）：

2×预混缓冲液 10 μL

酶混合液 0.5 μL

引物（需自备）各0.4 μM

RNA模板 2 μL

补足RNase-free H₂O至20 μL。

程序设置：

反转录：50℃ 15分钟 → 95℃ 1分钟（酶激活）。

PCR扩增：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（40循环），熔解曲线分析（65℃~95℃）。

操作注意事项

阳性对照：因浓度较高，需在独立区域操作，避免交叉污染。

适用仪器：兼容主流荧光定量PCR仪（如ABI、Bio-Rad、Roche LightCycler等）。

样本处理：建议使用无菌采集的犬全血或组织样本，按标准方法提取DNA。

性能参数

检测限：可检出低至10拷贝/μL的巴贝斯虫DNA。

特异性：不与犬常见其他病原体（如埃立克体、利什曼原虫）交叉反应。

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