柏氏巴贝斯虫染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

柏氏巴贝斯虫染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

检验原理

本试剂盒采用SYBR Green I荧光染料法，针对柏氏巴贝斯虫基因组保守区域设计特异性引物，通过实时荧光定量PCR技术对靶标核酸进行扩增检测。扩增过程中释放的荧光信号由仪器实时监测，实现定性及定量分析。

试剂组成

柏氏巴贝斯虫预混PCR反应液（含SYBR Green I）

柏氏巴贝斯虫特异性引物混合液

阳性对照（1×10^8拷贝/μL）

阴性对照（无核酸酶水）

说明书

储存条件及有效期

-20℃避光保存，避免反复冻融（≤7次），有效期12个月。

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪，包括：

ABI 7500/QuantStudio系列

Bio-Rad CFX系列

Roche LightCycler系列

Eppendorf Mastercycler ep realplex

自备耗材与设备

无核酸酶的PCR管、吸头（10/200/1000μL）

离心机、涡旋振荡器

移液器（0.5-10μL、10-100μL、100-1000μL）

样品要求

样本类型：全血、组织提取物或培养物，需避免交叉污染。

保存条件：短期（1周内）可存于-20℃，长期需-70℃保存，避免反复冻融。

运输：2-8℃冰袋运输，严禁高温暴露。

使用方法

核酸提取：按标准方法提取样本DNA，建议使用商品化核酸提取试剂盒。

反应体系配制：

每20μL反应体系含预混液10μL、引物混合液2μL、模板DNA 5μL、无核酸酶水补足至20μL。

PCR程序：

预变性：95℃ 5分钟

循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光）

数据分析：

定性：Ct值≤35判为阳性；

定量：通过标准曲线计算拷贝数。

注意事项

不同批次试剂不可混用。

实验分区操作（试剂配制区、样本处理区、扩增区），避免气溶胶污染。

阳性对照需与待测样本分装保存，防止污染。

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