腮腺炎病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

腮腺炎病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于SYBR Green I染料法，专为腮腺炎病毒RNA的荧光定量RT-PCR检测设计，实现反转录（RT）与定量PCR（qPCR）的一管式反应，避免交叉污染，提高检测效率。适用于临床样本、环境监测及科研领域的病毒载量分析。

检测原理

反转录：采用耐热逆转录酶高效合成cDNA。

定量扩增：通过HotStart Taq DNA聚合酶与优化缓冲体系，结合病毒特异性引物，实现高灵敏度扩增，SYBR Green I染料嵌入双链DNA后产生荧光信号，实时监测扩增曲线。

产品组分

| 组分编号 | 组分名称 | 规格（20 T） |

| A | 2×荧光定量预混缓冲液 | 250 μL |

| B | 逆转录酶与Taq酶混合液 | 20 μL |

| C | RNase-free H2O | 250 μL |

| D | 阳性对照（无传染性DNA）| 50 μL |

性能参数

灵敏度：可检测低至0.1 pg病毒RNA（高表达靶标）或1 pg（中等表达靶标）。

特异性：引物针对腮腺炎病毒保守区设计，无交叉反应。

线性范围：定量检测覆盖5个数量级（10²~10⁷拷贝/μL）。

稳定性：预混液4℃保存24小时性能无变化。

操作步骤

样本处理：提取待测RNA，避免降解。

反应体系配制（20 μL/反应）：

2×预混缓冲液 10 μL

酶混合液 1 μL

引物（10 μM）各0.4 μL

RNA模板 2 μL

RNase-free H2O 补至20 μL。

程序设置：

反转录：50℃ 15分钟 → 95℃ 5分钟。

PCR扩增：95℃ 10秒，60℃ 30秒（40循环），熔解曲线分析。

质量控制

阳性对照：试剂盒提供非传染性DNA片段，用于验证反应有效性。

阴性对照：建议每批次检测设置无模板对照（NTC）。

注意事项

操作需在独立洁净区域进行，防止气溶胶污染。

标准曲线需使用试剂盒提供的阳性对照梯度稀释制备。

本产品仅限科研使用，临床诊断需经进一步验证。

储存与运输

保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

有效期：12个月。

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