沙门氏菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒

沙门氏菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

主要成分

2×qPCR Mix（含上样染料，可直接电泳）

stn基因特异性引物对（预混液）

阳性对照（1×10^9拷贝/μL）

超纯水（1 mL）

使用手册

产品特点

即开即用：用户仅需提供样品DNA模板，操作简便。

高特异性：针对沙门氏菌保守基因（如stn基因）设计引物，避免交叉反应。

定量精准：荧光定量PCR技术，动态范围广（10^2~10^7拷贝/μL）。

内置对照：含阳性对照，便于实验质控和结果分析。

操作流程

样品DNA制备

使用常规方法（如试剂盒法）提取细菌基因组DNA，建议浓度≥10 ng/μL。

阳性对照稀释（可选）

按10倍梯度稀释阳性对照（如10^2~10^7拷贝/μL），独立操作以避免污染。

标记离心管，加入稀释液后涡旋混匀。

PCR反应体系（20 μL体系）

| 成分 | 体积（μL） |

| 2×qPCR Mix | 10 |

| 引物混合液 | 0.8 |

| 模板DNA | 2 |

| 超纯水 | 7.2 |

PCR程序设置

预变性：95℃ 5 min

循环阶段（40 cycles）：95℃ 15 sec → 60℃ 30 sec（荧光采集）

溶解曲线分析：60℃~95℃（0.5℃/sec）

注意事项

防污染：试剂分装使用，避免反复冻融；操作区与扩增区需物理隔离。

质量控制：每次实验需包含阴性对照（超纯水替代模板）和阳性对照。

数据判读：Ct值≤35且溶解曲线为单一峰时判定为阳性。

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