都柏林沙门氏菌染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

都柏林沙门氏菌染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月；阳性对照需单独存放，避免污染。

运输方式：低温泡沫箱加冰密封运输。

检验原理

采用SYBR Green荧光染料法实时定量PCR技术，针对都柏林沙门氏菌基因组高度保守区域设计特异性引物，通过实时监测扩增过程中的荧光信号，实现对靶标核酸的定性和定量分析。

试剂组成

都柏林沙门氏菌扩增液（含引物、dNTPs、缓冲体系等）

SYBR Green荧光染料

阳性对照（无传染性DNA片段）

荧光PCR专用模板稀释液

说明书

操作步骤

样本制备：提取待测样本DNA，建议浓度范围10^2–10^7拷贝/μL。

标准曲线制备（定量检测适用）：

将阳性对照按10倍梯度稀释（6个浓度点），标记为2–7号管，每管加入45μL稀释液混匀。

反应体系配制：

按20μL/反应配制，避光操作，避免气泡产生。

PCR程序设置：

预变性：95℃ 2分钟；

扩增循环：95℃ 15秒→60℃ 30秒（采集荧光信号），共40个循环；

熔解曲线分析：60–95℃，每0.5℃递增。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、加样需在不同区域进行，防止交叉污染。

质量控制：

每批次实验需包含阴性对照（无模板对照）和阳性对照。

熔解曲线应为单一峰，确保扩增特异性。

安全防护：使用一次性耗材，实验后工作台需用10%次氯酸或75%乙醇消毒。

性能参数

灵敏度：可检测低至10^2拷贝/μL的靶标核酸。

特异性：引物经优化，不与相近物种核酸发生交叉反应。

线性范围：定量检测覆盖5个数量级（10^2–10^7拷贝/μL）。

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