乙型肝炎病毒G型染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

预期用途

本试剂盒基于SYBR Green I 荧光染料法，用于定量检测人血清或血浆样本中的乙型肝炎病毒（HBV）基因G型DNA，适用于：

HBV G型感染的辅助诊断

抗病毒治疗效果监测

疾病进展评估与预后判断

注：HBV G型为罕见基因型，通常与A型共感染，需结合分型结果综合解读。

检测原理

核酸提取：磁珠法提取样本中HBV DNA。

PCR扩增：

采用G型特异性引物靶向HBV核心区保守序列。

SYBR Green I 染料实时嵌入双链DNA，荧光信号强度与DNA含量成正比。

定量分析：通过标准曲线计算样本中HBV DNA拷贝数（IU/mL）。

主要组成成分

| 组分 | 规格（96测试） | 储存条件 |

| G型PCR反应液 | 1.2 mL × 2管 | -20℃避光 |

| 酶混合液 | 150 μL × 1管 | -20℃ |

| HBV G型阳性标准品 | 1.0×10⁶ IU/mL × 5管 | -70℃ |

| 阴性对照 | 1 mL × 1管 | -20℃ |

| DNA提取试剂盒 | 96人份 | 室温 |

技术性能

灵敏度：检测下限（LOD）15 IU/mL。

线性范围：1.0×10² ~ 1.0×10⁸ IU/mL（R² ≥ 0.99）。

特异性：

不与其他HBV基因型（A-F, H）交叉反应；

与HCV、HIV、CMV等常见病原体无交叉。

精密度：

批内/批间CV ≤ 5%。

操作步骤

核酸提取：取200 μL血清/血浆，按DNA提取试剂盒说明操作。

配制PCR体系：

| 组分 | 体积（μL） |

| G型PCR反应液 | 15 |

| 酶混合液 | 1 |

| 模板DNA | 4 |

上机扩增：

程序：95℃ 5min → (95℃ 10s → 60℃ 30s) × 45循环 → 熔解曲线分析。

结果判读：

阳性：Ct值 ≤ 38.0，熔解曲线峰值在82±1℃；

可疑：Ct值 >38.0需复测；

定量：根据标准曲线自动计算IU/mL。

注意事项

样本要求：

使用EDTA或枸橼酸钠抗凝血浆，避免肝素干扰；

2~8℃保存不超过72小时，-70℃长期保存。

熔解曲线验证：必须通过熔解峰温度确认产物特异性，排除非特异性扩增。

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