乙型肝炎病毒通用型染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

产品用途

科研实验，适用于乙型肝炎病毒（HBV）DNA的定性及定量检测。

技术原理

基于SYBR Green I染料法荧光定量PCR技术，通过特异性引物扩增HBV保守区序列，染料与双链DNA结合后释放荧光信号，实时监测扩增进程，实现病毒载量检测。

产品特点

即开即用：预混反应液含PCR所需酶、dNTPs及优化缓冲体系，仅需加入模板DNA和引物。

高灵敏度：检测下限可达10-100 copies/μL，线性范围覆盖5个数量级（10^1~10^6 copies/μL）。

特异性强：引物针对HBV通用型保守区设计，避免与其他病原体或人源DNA交叉反应。

内控系统：提供阳性对照（HBV质粒标准品）和阴性对照（无模板对照），确保结果可靠性。

适配性广：兼容常见荧光定量PCR仪（如ABI 7500、Bio-Rad CFX等）。

操作流程

样本准备：提取待测样本DNA（血清/血浆/组织），建议使用柱式核酸提取试剂盒。

反应体系配制（20μL）：

预混PCR Master Mix：10μL

引物混合液：2μL

模板DNA：2μL（≤200 ng）

RNase-free水：补至20μL

PCR程序：

预变性：95℃ 5分钟

循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光）

熔解曲线分析：60℃~95℃，每0.5℃递增

结果判读

定量分析：通过标准曲线计算样本中HBV DNA拷贝数。

熔解曲线：单一峰值表明扩增特异性良好，杂峰提示引物二聚体或污染。

注意事项

实验需在无菌环境下操作，避免气溶胶污染。

阳性对照与待测样本应分区域处理，防止交叉污染。

若样本Ct值＞35，建议重复检测或稀释后复测以排除抑制剂干扰。

本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。

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