无绿藻通用染料法荧光定量PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒为基于SYBR Green I染料的通用型荧光定量PCR预混体系，适用于RNA/DNA模板的一步法或两步法检测，无需针对不同仪器平台调整ROX参比染料，兼容主流qPCR仪（如ABI 7500、QuantStudio系列、Agilent Mx3000P等）。试剂盒整合高效反转录酶与热启动Taq酶，实现高灵敏度（RNA检测下限达0.1 pg）和稳定扩增（96复孔Ct值偏差<0.2），适用于动植物组织、微生物、病毒核酸的绝对或相对定量。

产品组分

| 组分编号 | 组分名称 | 规格（20 T/200 T） |

| A | 2× Universal SG Buffer | 250 μL / 2×1.25 mL |

| B | UH Enzyme Mix | 20 μL / 200 μL |

| C | RNase-free H₂O | 250 μL / 2×1.25 mL |

| 可选 | Universal Dye (50X) | 100 μL |

核心特性

全平台兼容性

适配No/Low/High ROX机型，无需调整参比染料浓度。

高灵敏度与精准度

RNA模板：可检测0.1 pg（高表达靶标）至1 pg（中表达靶标）；DNA模板支持单拷贝检测。

可分辨2倍浓度差异的模板。

稳定性与重复性

预混液4℃保存24小时性能无变化；90复孔间Ct值差异极小。

快速扩增

反应时间优化至46分钟内完成。

操作流程

试剂准备

冰上解冻预混液，轻柔颠倒混匀，避免气泡。

短暂离心（1000 rpm, 5-10秒）后置于冰上备用。

反应体系配置

推荐20 μL体系：10 μL 2× Buffer + 0.4 μL Enzyme Mix + 模板+引物（终浓度0.2 μM）+补足RNase-free H₂O。

qPCR程序

反转录（可选）：50℃ 15分钟 → 95℃ 1分钟。

扩增：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（40循环），熔解曲线阶段按仪器默认设置。

注意事项

避免反复冻融试剂，分装保存于-20℃。

模板稀释时使用无核酸酶水，防止降解。

熔解曲线需单峰以确保扩增特异性。

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