无浆体(无形体)通用染料法荧光定量PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒基于SYBR Green I染料法，适用于无浆体（无形体）等病原体的RNA或DNA靶标的高灵敏度荧光定量检测。通过优化的一管式反应体系，同步完成反转录（RNA模板）和qPCR扩增，减少操作步骤，降低污染风险。

产品组分

| 组分编号 | 组分名称 | 规格（20 T） | 规格（200 T） |

| A | 2× Advanced SG Buffer | 250 μL | 2×1.25 mL |

| B | Advanced UH Enzyme Mix | 20 μL | 200 μL |

| C | RNase-free H₂O | 250 μL | 2×1.25 mL |

产品特性

高灵敏度

RNA模板：高表达靶标检测限达0.1 pg，中等表达靶标达1 pg。

DNA模板：灵敏度可至单拷贝级别。

精准性与重复性

可区分2倍浓度差异的模板，90复孔CV值<5%。

稳定性

预混体系在4℃下稳定24小时，性能无显著变化。

仪器兼容性

适配国内外主流荧光定量PCR仪（No/Low/High Rox平台）。

实验流程

反应体系配置（以20 μL为例）：

2× Advanced SG Buffer：10 μL

正向/反向引物（10 μM）：各0.4 μL

Advanced UH Enzyme Mix：1 μL

RNA/DNA模板：1–5 μL

RNase-free H₂O：补至20 μL。

程序设置：

反转录（RNA模板）：50℃ 15分钟（可选）。

预变性：95℃ 5分钟。

扩增：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（40循环）。

熔解曲线分析：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟 → 95℃ 15秒。

注意事项

储存条件：-20℃保存，避免反复冻融；4℃短期保存不超过3个月。

应用限制：仅限科研使用，不适用于临床诊断。

污染控制：建议在超净台或PCR工作站中操作。

性能验证数据

扩增效率：标准曲线R²≥0.99，斜率-3.1至-3.5。

特异性：熔解曲线单峰，无非特异性扩增。

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