中央无浆体(无形体)染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

预期用途

本试剂盒基于SYBR Green染料法荧光定量PCR技术，专用于检测中央无浆体（Anaplasma centrale）的核酸。适用于科研、动物疫病监测及流行病学调查，可实现对样本的定性和定量分析，但不适用于临床诊断。

检验原理

采用针对Anaplasma centrale保守基因区域设计的特异性引物，通过实时荧光PCR扩增靶序列。

SYBR Green染料与双链DNA结合后释放荧光信号，通过仪器监测荧光强度变化，实现核酸的检测与分析。

分析灵敏度可达100拷贝/反应，线性范围覆盖至少5个数量级。

试剂组成

中央无浆体扩增预混液：含优化缓冲液、dNTPs、热启动DNA聚合酶及SYBR Green染料。

特异性引物混合物：针对Anaplasma centrale设计的引物对。

阳性质控品：已知拷贝数的靶序列（1×10^8 拷贝/μL）。

阴性质控品：无核酸酶水，用于排除污染。

自备试剂与仪器

样本要求：需提供提取的DNA模板（建议浓度≥10 ng/μL）。

适用仪器：

ABI 7500/QuantStudio系列

安捷伦MX3000P/3005P

Roche LightCycler

Bio-Rad CFX系列

Eppendorf RealPlex

运输与保存

运输条件：低温冰袋运输（-20℃）。

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

操作流程

反应体系配制：按20μL体系混合预混液、引物及模板DNA。

PCR程序设置：

预变性：95℃ 5分钟；

扩增循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40个循环，采集荧光信号）。

数据分析：通过标准曲线或Ct值判定样本中靶标核酸的浓度。

注意事项

避免反复冻融试剂，分装后使用。

实验需在无菌环境下操作，防止交叉污染。

阳性质控品需单独存放，避免污染其他组分。

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