肝片吸虫染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

产品用途

本试剂盒基于荧光定量PCR技术，专为科研领域设计，用于检测牛、羊、人等样本中肝片吸虫的特异性DNA序列，适用于流行病学调查、病原体载量分析及实验室研究。

检测原理

采用SYBR Green I染料法实时荧光定量PCR技术，通过特异性引物扩增肝片吸虫基因组保守区域，染料与双链DNA结合后释放荧光信号，通过Ct值实现定性与相对定量分析。

产品组成

（以50次反应为例）

2×SYBR qPCR预混液（500 μL）：含DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液及优化剂。

肝片吸虫特异性引物混合液（100 μL）：针对Fasciola hepatica保守基因设计。

荧光PCR模板稀释液（1 mL）：用于阳性对照梯度稀释。

阳性对照（50 μL，1×10⁸拷贝/μL）：非感染性标准DNA片段。

阴性对照（250 μL）：无菌水，用于排除污染。

使用说明书（1份）。

储存与运输

储存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

运输方式：低温干冰运输，避免反复冻融。

操作步骤

样本处理：按标准方法提取样本DNA（需自备提取试剂）。

反应体系配制：

预混液10 μL + 引物混合液2 μL + 模板DNA 2 μL + 无核酸酶水6 μL（总体积20 μL）。

PCR程序设置：

预变性：95℃ 3分钟；

扩增：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（40循环，荧光采集）。

数据分析：通过仪器软件分析扩增曲线及Ct值，判定阴阳性。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需在不同区域进行，避免交叉污染。

质控要求：每批次实验需包含阳性对照和阴性对照。

生物安全：实验废弃物需经10%次氯酸或75%酒精处理，符合实验室生物安全规范。

适用范围：仅限科研，不可用于临床诊断。

性能参数

灵敏度：≤10拷贝/反应。

特异性：不与大片吸虫（F. gigantica）及其他常见寄生虫DNA发生交叉反应。

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