禽沙门氏菌染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

禽沙门氏菌染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

检验原理

本试剂盒基于SYBR Green染料法实时荧光PCR技术，针对禽沙门氏菌（Salmonella gallinarum）基因组高度保守区域设计特异性引物。通过荧光信号实时监测核酸扩增过程，实现定性及定量检测。扩增过程中，荧光信号强度与目标DNA含量成正比，经仪器分析输出结果。

试剂组成

| 成分 | 规格 |

| 禽沙门氏菌扩增液 | 50μL × 1管 |

| 禽沙门氏菌反应液 | 950μL × 1管 |

| 阳性质控品（DNA片段）| 50μL × 1管（1×10^8拷贝/μL） |

| 阴性质控品（超纯水）| 50μL × 1管 |

保存条件与有效期

保存温度：-20℃避光保存。

有效期：12个月（未开封状态下）。

操作步骤

样品DNA制备

使用常规方法提取待测样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL。

阳性对照稀释（可选标准曲线制备）

将阳性质控品按10倍梯度稀释（10^2–10^7拷贝/μL），独立操作避免污染。

PCR反应体系配制

每20μL反应体系包含：

10μL 2×qPCR Mix（含SYBR Green染料）

2μL 引物混合液

2μL 模板DNA（样品或对照）

6μL 超纯水

扩增程序

预变性：95℃ 5分钟；

循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（荧光采集）；

熔解曲线分析：60–95℃（每0.5℃递增）。

结果判读

阳性：Ct值≤35，且熔解曲线峰值与对照一致；

阴性：无Ct值或Ct值＞38。

注意事项

试剂开封后需分装保存，避免反复冻融。

实验区域需严格分区（试剂配制、样本处理、扩增区），防止交叉污染。

本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。

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