火鸡沙门氏菌染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

火鸡沙门氏菌染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品特点

即开即用：用户仅需提供DNA模板，无需额外配制主反应混合液。

高特异性：针对火鸡沙门氏菌保守序列设计的引物，避免与其他病原体交叉反应。

高灵敏度：检测下限可达数百拷贝/反应。

闭管检测：一管式荧光定量PCR设计，减少气溶胶污染风险。

适用范围：仅限科研用途，不可用于临床诊断。

主要成分

| 成分 | 包装规格 | 备注 |

| 2×qPCR MagicMix | 500μL（棕色管） | 预混荧光定量PCR反应液 |

| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL（黄盖） | 用于标准品稀释 |

| PCR引物混合物 | 100μL（白盖） | 特异性引物及探针 |

| PCR阳性对照 | 50μL（红盖） | 1×10^8拷贝/μL DNA片段 |

| 使用手册 | 1份 | 含详细操作流程 |

运输与保存

运输条件：低温运输（-20℃冰袋或干冰）。

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

自备试剂

DNA模板（待测样本）

10×ROX校正染料（根据机型需求，参见仪器说明书）

使用方法

1. 阳性对照稀释（10^2–10^7拷贝/μL梯度制备）

步骤：

标记6支离心管（编号7至2），每管加入45μL模板稀释液。

取5μL原液（10^8拷贝/μL）加入7号管，震荡混匀，得到10^7拷贝/μL标准品。

依次梯度稀释至2号管（10^2拷贝/μL），每次更换枪头，冰上暂存。

2. PCR反应体系配制

每20μL反应体系建议配比：

2×qPCR MagicMix：10μL

引物混合物：2μL

DNA模板：2μL

ROX染料（可选）：按机型要求添加

补足ddH₂O至20μL。

3. 扩增程序设置

预变性：95℃ 3分钟

循环阶段（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）

注意事项

阳性对照稀释需在独立洁净区域操作，避免污染。

试剂解冻后需彻底混匀，避免反复冻融（建议分装保存）。

实验废弃物需按生物安全规范处理。

质量控制

阳性对照：Ct值≤30，且扩增曲线呈典型S型。

阴性对照：无扩增信号（Ct值≥40或无曲线）。

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