链球菌A组染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

链球菌A组染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

检验原理

本试剂盒采用SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术，针对A组β溶血性链球菌（GAS）的基因高度保守区域设计特异性引物，通过荧光信号检测实现核酸的定性及定量分析。反应体系中若存在目标核酸模板，PCR扩增将释放荧光信号，仪器实时监测并输出数据。

产品特点

即开即用：仅需提供待测DNA模板即可进行检测。

高灵敏度：优化引物设计，检测下限低至10拷贝/μL。

高特异性：引物针对GAS保守区设计，避免与其他微生物核酸交叉反应。

双重功能：支持定性和定量检测，定量线性范围达5个数量级（10^2~10^7拷贝/μL）。

内置对照：提供阳性质控品（非活体DNA片段），便于区分假阴性结果。

操作流程

样本准备

临床样本（如咽拭子、病灶分泌物）：

采集后立即置于无菌运输培养基，-80℃保存或尽快提取DNA。

血液样本：

采集2mL静脉血至EDTA抗凝管，混匀后分离血浆提取DNA。

食品/环境样本：

按微生物学标准预处理后提取核酸。

试剂配制

解冻与混匀：

试剂于冰上缓慢解冻，轻弹混匀后短暂离心（1000 rpm，10秒）。

反应体系（20μL/孔）：

预混液10μL + 引物混合液2μL + 模板DNA 5μL + RNase-free水3μL。

PCR扩增

程序设置（以ABI 7500为例）：

预变性：95℃ 5分钟；

循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（荧光采集）；

熔解曲线分析：60℃~95℃，升温速率0.3℃/秒。

结果判读

定性：Ct值≤35且熔解曲线峰单一判为阳性；

定量：根据标准曲线计算拷贝数。

注意事项

实验分区操作，避免气溶胶污染。

阴性对照（NTC）需设置，以排除试剂污染。

重复实验建议≥3次，确保数据可靠性。

储存与运输

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

运输：冰袋低温运输。

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