双埃柯病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

双埃柯病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒采用染料法荧光定量PCR技术，专用于双埃柯病毒（Parechovirus, PeV）核酸的定性或定量检测。适用于科研用途，不可用于临床诊断。

产品特点

高特异性：基于双埃柯病毒保守序列设计引物，避免与其他病毒交叉反应。

高灵敏度：检测限可达几百拷贝/反应。

便捷性：即开即用，用户仅需提供病毒样本。

防污染设计：一管式闭管检测，减少扩增产物污染风险。

稳定性：-20℃保存条件下有效期12个月。

规格与成分

2×qPCR MagicMix：500 μL（棕色管）

荧光PCR专用模板稀释液：1 mL（黄盖）

双埃柯病毒PCR引物混合物：100 μL（白盖）

阳性对照（1×10^8 拷贝/μL）：50 μL（红盖）

使用手册：1份

运输与保存

运输条件：低温运输（冰袋或干冰）。

保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

自备试剂

DNA模板

10×ROX校正染料（根据机型需求选择，详见操作指南）。

操作步骤

1. 阳性对照稀释（以10^2–10^7拷贝/μL梯度为例）：

标记6管稀释管（7–2号），每管加45 μL稀释液。

依次梯度稀释阳性对照（从10^8拷贝/μL起始），每步换枪头并充分震荡。

稀释后置于冰上备用。

2. 样本处理

样本DNA提取需在独立区域完成，避免交叉污染。

3. PCR反应体系配制

按20 μL体系混合各组分（具体比例参考手册），避光操作。

4. 上机检测

按仪器说明书设置程序：预变性（95℃, 5 min）→ 循环扩增（95℃ 10 s, 60℃ 30 s, 40循环）。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、加样需在不同区域进行。

防污染措施：使用一次性耗材，实验后以10%次氯酸或75%酒精清洁台面及移液器。

保存要求：反应液避光保存，避免气泡干扰。

废弃物处理：所有试剂盒组分按生物危害废物规范处置。

质量控制

阳性对照应呈现典型S型扩增曲线，阴性对照无扩增信号。

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