施氏油脂线虫染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

施氏油脂线虫染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品用途

仅供科研使用，适用于施氏油脂线虫（Elaeophora schneideri）的快速、灵敏检测。

产品特点

即开即用：用户仅需提供样品DNA/RNA模板，无需额外优化引物或探针。

高灵敏度与特异性：

引物及探针针对施氏油脂线虫高度保守区设计，避免与其他病原体核酸交叉反应。

检测限低至10^2拷贝/μL，线性范围覆盖5个数量级（10^2-10^7拷贝/μL）。

内置对照系统：

提供预稀释的DNA片段作为阳性对照（非活体样品），便于排除假阴性结果。

双重检测模式：支持定性和定量分析，兼容染料法荧光定量PCR平台。

试剂盒组分

主反应混合液：含dNTPs、缓冲液、热启动DNA聚合酶、荧光染料。

引物探针混合液：优化后的特异性引物及探针（冻干粉或预混液）。

阳性对照：1×10^8拷贝/μL的DNA片段（需按说明书稀释使用）。

阴性对照：无核酸酶水。

模板稀释液：用于标准品梯度稀释。

实验步骤

1. 阳性对照稀释（示例：6个梯度）

注意事项：操作需在独立洁净区域进行，避免污染。

步骤：

a. 标记离心管（7-2号），每管加45μL模板稀释液。

b. 7号管加入5μL原液（10^8拷贝/μL），震荡混匀得10^7拷贝/μL，依次稀释至10^2拷贝/μL。

2. PCR反应体系配制（20μL/反应）

| 组分 | 体积（μL） |

| 主反应混合液 | 10 |

| 引物探针混合液 | 2 |

| 模板DNA/稀释对照 | 2 |

| 无核酸酶水 | 6 |

3. 扩增程序

| 步骤 | 温度（℃） | 时间 | 循环数 |

| 预变性 | 95 | 5 min | 1 |

| 变性 | 95 | 15 sec | 40 |

| 退火/延伸 | 60 | 30 sec | |

结果分析

定量检测：以Ct值与标准曲线计算模板拷贝数。

定性检测：根据扩增曲线和熔解曲线判定阳性/阴性。

注意事项

避免反复冻融试剂，分装后使用。

实验废弃物需按生物安全规范处理。

不同试剂盒组分可能存在差异，请以实际说明书为准。

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