黄杆菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

检验原理

采用SYBR Green I荧光染料法，针对黄杆菌属高度保守基因区域设计特异性引物，通过实时荧光PCR技术对目标核酸进行扩增检测。扩增过程中释放的荧光信号由仪器实时监测，实现定性或定量分析。

试剂组成

| 名称 | 规格 |

| 黄杆菌通用预混液 | 1 mL×1管 |

| 阳性对照（DNA模板） | 50 μL×1管 |

| 阴性对照（无核酸酶水） | 50 μL×1管 |

| RNase-Free Water | 1 mL×1管 |

| 说明书 | 1份 |

储存条件及有效期

-20℃避光保存，避免反复冻融（≤7次），有效期12个月。

适用仪器

兼容ABI 7500、Roche LightCycler 480、Bio-Rad CFX96等主流荧光定量PCR仪。

自备耗材

无核酸酶PCR管/板

滤芯吸头（10/200/1000 μL）

离心机、涡旋振荡器

样品要求

样本类型：水样、土壤提取液或细菌培养物（需按《微生物样本采集指南》处理）。

保存条件：短期-20℃保存，长期建议-70℃（避免冻融＞3次）。

实验步骤

样本处理：

使用核酸提取试剂盒提取样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL。

反应体系配制（20μL）：

预混液         10 μL  

模板DNA        2 μL  

引物混合液     2 μL  

RNase-Free Water 至20 μL  

PCR程序：

预变性：95℃ 5 min

循环：95℃ 10 sec → 60℃ 30 sec（40循环，采集荧光）

结果判读：

阳性：Ct值≤35，且扩增曲线呈S型；

可疑：35<Ct<40，需复测；

阴性：Ct值≥40或无扩增。

注意事项

本产品仅限科研用途。

实验需在生物安全柜内操作，避免气溶胶污染。

不同批号组分不可混用。

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