肠粘附性大肠杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

检测原理

基于染料法荧光定量PCR技术，特异性扩增肠粘附性大肠杆菌保守基因序列，结合荧光信号实时定量分析。

产品用途：科研检测（不适用于临床诊断）

产品特点

即开即用：用户仅需提供待测DNA模板。

高灵敏度：检测下限可达几百拷贝/反应。

高特异性：引物针对肠粘附性大肠杆菌保守序列设计，与其他病原体无交叉反应。

一管式检测：闭管操作减少污染风险。

宽线性范围：定量检测覆盖5个数量级（10^2–10^7拷贝/μL）。

规格与组分

| 成分 | 规格/包装量 | 保存条件 |

| 2×qPCR预混液 | 500 μL（含荧光染料） | -20℃避光 |

| 荧光PCR模板稀释液 | 1 mL | -20℃ |

| 肠粘附性大肠杆菌引物混合物 | 100 μL（干粉或溶液） | -20℃干燥保存 |

| 阳性对照（10^8拷贝/μL） | 50 μL | -20℃单独存放 |

| 使用手册 | 1份 | 常温 |

运输与保存

运输条件：低温干冰运输。

保存期限：-20℃避光保存，有效期12个月。

自备试剂与仪器

仪器：支持染料法的荧光定量PCR仪（需根据机型自备ROX校正液）。

耗材：无核酸酶离心管、带滤芯枪头、冰盒。

操作步骤

1. 阳性对照稀释（示例：10^2–10^7拷贝/μL梯度）

标记6管，依次加入45 μL稀释液，梯度稀释阳性对照（每步换枪头）。

稀释后立即冰上保存，避免反复冻融。

2. PCR反应体系（20 μL/反应）

| 组分 | 体积（μL） |

| 2×qPCR预混液 | 10 |

| 引物混合物 | 2 |

| DNA模板/对照 | 2 |

| 无核酸酶水 | 补足至20 |

3. 扩增程序

预变性：95℃ 3分钟；

循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循环，采集荧光信号）。

注意事项

阳性对照需在独立区域操作，避免污染。

建议重复3次实验以确保数据可靠性。

废弃组分需按生物危害品处理。

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