志贺氏菌属通用染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

预期用途

本试剂盒基于实时荧光定量PCR技术，用于定性检测食品、临床样本（如粪便、肛门拭子）或环境样本中的志贺氏菌核酸，适用于病原体筛查及流行病学调查。

检测原理

通过设计志贺氏菌特异性基因引物及荧光标记探针，在PCR扩增过程中，探针与靶基因结合后被Taq酶水解，释放荧光信号。荧光定量PCR仪实时监测信号强度，生成扩增曲线，实现定性分析。

产品组分

PCR反应液：含引物、探针、dNTPs及缓冲体系（500 μL/管或1000 μL/管，对应25T/50T规格）

阳性对照：含志贺氏菌靶基因的质粒（40 μL/管）

阴性对照：灭菌纯水（40 μL/管）

说明书：1份

储存条件与有效期

-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期12个月。

灵敏度与特异性

最低检测限：≤100 CFU/Test

特异性：针对志贺氏菌属保守基因设计，避免交叉反应。

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪，包括：

ABI 7500/QuantStudio系列

Bio-Rad CFX系列

Roche LightCycler 480

杭州博日系列等（需支持FAM通道）

样本要求

样本类型：食品、粪便、呕吐物、肛门拭子、菌落等。

处理要求：

新鲜样本需用灭菌生理盐水悬浮；

长期保存需-20℃至-80℃冻存，避免反复冻融。

核酸提取：建议采用商业化DNA提取试剂盒。

操作步骤

试剂准备：

解冻试剂，瞬时离心混匀；

按反应数（n=样本数+阴阳对照+误差预留）分装反应液（20 μL/管）。

加样：加入5 μL模板DNA或对照品。

PCR扩增：

循环参数：

预变性：95℃ 2min（1循环）；

扩增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循环，60℃时收集荧光信号）。

结果判读：

Ct值≤35且曲线呈S型为阳性；

无扩增曲线或Ct值＞35为阴性。

注意事项

实验需分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区）；

避免试剂污染，使用无核酸酶耗材；

若结果异常，需复核阴阳对照及样本处理步骤。

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