马蛔虫染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

检验原理

本试剂盒采用SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术，针对马蛔虫(Parascaris equorum)基因高度保守区域设计特异性引物，通过荧光PCR技术对马蛔虫核酸进行体外扩增检测。当反应体系中含有马蛔虫核酸模板时，PCR反应将进行并释放荧光信号，仪器可实时监测和输出相应通道信号，实现检测结果的定性和定量分析。

试剂组成

| 组分 | 规格 | 数量 |

| 马蛔虫扩增液 | 50μL | 1管 |

| 马蛔虫反应液 | 950μL | 1管 |

| 马蛔虫阳性质控品(1×10⁸拷贝/μL) | 50μL | 1管 |

| 马蛔虫阴性质控品(超纯水) | 50μL | 1管 |

| 说明书 | - | 1份 |

注：不同批号试剂盒组分不可交互使用。

适用仪器

兼容ABI、MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf等系列荧光定量PCR仪。

自备材料

无DNA/RNA酶的1.5mL离心管

0.2mL PCR反应管

滤芯吸头(10μL,200μL,1000μL)

离心机、振荡混合器

各种规格移液器

商业化DNA提取试剂盒

样品要求

样本类型：粪便、肠道内容物或组织样本

采集规范：避免样本间交叉污染，采集后应及时检测

保存条件：

短期保存：-20℃

长期保存：-70℃（不超过6个月）

运输条件：2-8℃冰袋运输，严禁反复冻融

操作流程

1. 样本处理（样本处理区）

使用商业化试剂盒提取样本DNA

设置对照：阳性对照（10μL阳性对照稀释液+水）、阴性对照（纯水）

2. PCR反应体系配制（试剂准备区）

按每管20μL分装PCR预混液至0.2mL反应管

加入18μL DNA模板（样本或对照品），避免气泡

加样顺序：先阴性对照→样本→阳性对照

3. PCR扩增程序（扩增区）

| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |

| 预变性 | 95℃ | 3 min | 1 |

| 变性 | 95℃ | 10 sec | 40 |

| 退火延伸 | 60℃ | 30 sec | |

| 荧光采集 | 退火延伸阶段 | FAM通道 | |

4. 结果分析

阈值设定：高于阴性对照最高荧光值

判定标准：

阳性：Ct值≤45且扩增曲线呈典型S型

阴性：无Ct值或Ct值＞45

可疑样本：35<Ct值≤45，建议复检

注意事项

防污染措施：

严格分区操作（试剂准备、样本处理、PCR扩增）

使用专用耗材及实验服

阳性对照单独存放，操作后紫外消毒台面

性能参数

特异性：针对马蛔虫保守基因序列设计，与其他寄生虫或宿主DNA无交叉反应

灵敏度：可检测低至10²拷贝/μL的马蛔虫DNA

本产品仅限科研使用

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