诺氏梭状芽孢杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒

诺氏梭状芽孢杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品特点

即开即用：用户仅需提供DNA模板，试剂盒含预混反应体系。

高特异性：针对诺氏梭状芽孢杆菌保守序列设计引物，无交叉反应。

高灵敏度：检测下限达数百拷贝/反应。

闭管操作：一管式荧光定量PCR，避免气溶胶污染。

适用范围：科研用途（不可用于临床诊断）。

试剂盒组成

| 成分 | 包装规格 | 备注 |

| 2×qPCR MagicMix | 500 μL（棕色管） | 含荧光染料、dNTPs、酶等 |

| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL（黄盖） | 用于标准品稀释 |

| PCR引物混合物 | 100 μL（白盖） | 特异性引物及探针 |

| PCR阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL（红盖/黄盖） | 非活体DNA片段 |

| 使用手册 | 1份 | 含操作流程及注意事项 |

自备试剂：DNA模板、10×ROX（依机型需求）。

操作流程

1. 阳性对照稀释（10²–10⁷拷贝/μL梯度制备）

在独立洁净区操作，使用带滤芯枪头避免污染。

取6管，分别加入45 μL稀释液，依次进行10倍梯度稀释（步骤详见说明书）。

2. PCR反应体系配制

反应体系（20 μL）：

2×qPCR MagicMix：10 μL

引物混合物：2 μL

DNA模板：2 μL

ROX（可选）：依仪器要求添加

ddH₂O：补至20 μL

3. 扩增程序设置

预变性：95℃ 5分钟

循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集荧光信号）

4. 数据分析

阈值循环数（Ct值）≤35判定为阳性，需结合阴性/阳性对照结果。

注意事项

分区操作：试剂准备区、样本处理区、扩增区需物理隔离，避免交叉污染。

防RNA降解：样本处理全程低温（0–4℃），使用无核酶耗材。

质量控制：每批次实验需设置阴/阳性对照。

安全规范：废弃物需无害化处理，实验服及器具分区专用。

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