雪腐镰刀菌染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

雪腐镰刀菌染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品特点

即开即用：用户仅需提供待测样本DNA模板，无需额外配制主反应混合液。

高特异性：针对雪腐镰刀菌保守序列设计引物，与其他镰刀菌属物种（如F. graminearum、F. oxysporum等）无交叉反应。

高灵敏度：可检测低至数百拷贝的靶标序列。

一管式检测：预混荧光染料（如SYBR Green I），减少开盖操作，降低污染风险。

兼容性广：适配主流荧光定量PCR仪（如ABI 7500/7900、RotorGene 6000、LightCycler 480等），部分机型需自备ROX校正染料（详见注意事项）。

试剂盒组分

2×qPCR MagicMix（含DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液及荧光染料）

雪腐镰刀菌特异性引物混合液

PCR阳性对照（冻干或液体形式）

超纯水（阴性对照）

说明书（含标准曲线构建方法及数据分析建议）

实验步骤（以20μL反应体系为例）

反应体系配制：

2×qPCR MagicMix：10 μL

引物混合液：2 μL

模板DNA：6 μL

ROX校正液（部分机型需添加）：2 μL

超纯水补足至20 μL。

PCR程序（需根据仪器优化）：

预变性：95℃ 5分钟

循环阶段（40-45次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）

熔解曲线分析（可选）：60℃至95℃，每0.5℃递增。

注意事项

ROX使用：仅ABI 7500/7700/7900需添加，其他仪器可用超纯水替代。

模板要求：DNA纯度（A260/A280）建议1.8-2.0，避免酚、乙醇残留。

质量控制：每次实验需包含阴性对照（无模板）和阳性对照（试剂盒提供）。

数据解读

阈值循环数（Ct值）：与标准曲线比对，定量目标DNA浓度。

熔解曲线：单峰表明扩增特异性良好，多峰提示引物二聚体或污染。

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