梨孢镰刀菌染料法荧光定量PCR试剂盒

梨孢镰刀菌染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术，专用于检测梨孢镰刀菌（Fusarium poae），适用于科研领域（不可用于临床诊断）。试剂盒采用保守序列设计的特异性引物，灵敏度达100-几百拷贝/反应，具有高特异性，可避免与其他病原体的交叉反应。

产品特点

即开即用：仅需提供样品DNA模板，操作简便。

高灵敏度与特异性：引物针对梨孢镰刀菌保守区域优化，检测限低至100拷贝/反应。

防污染设计：一管式反应体系，减少后续污染风险。

兼容性广：适用于ABI、Bio-Rad、LightCycler等主流荧光定量PCR仪。

稳定性：-20℃保存，有效期12个月。

规格与成分

| 成分名称 | 包装规格 | 说明 |

| 2×qPCR MagicMix | 500μL（棕色管） | 预混PCR反应液 |

| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1mL（黄盖） | 用于标准品稀释 |

| 梨孢镰刀菌PCR引物混合物 | 100μL（白盖） | 特异性引物及探针 |

| 阳性对照 | 1×10^8拷贝/μL | 无传染性DNA片段 |

操作流程

1. 试剂准备

将试剂盒组分解冻后充分混匀，短暂离心备用。

2. 标准曲线制备（示例：10^1-10^6拷贝/μL）

取6支离心管，编号1-6，每管加入45μL模板稀释液。

在6号管中加入5μL阳性对照（10^7拷贝/μL），震荡混匀得10^6拷贝/μL标准品，依次梯度稀释至10^1拷贝/μL。

3. PCR反应体系（20μL/反应）

| 组分 | 体积（μL） |

| 2×qPCR MagicMix | 10 |

| 引物混合物 | 2 |

| 模板DNA | 2 |

| ddH₂O | 6 |

4. 扩增程序

预变性：95℃ 3分钟；

循环阶段（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）。

注意事项

标准品稀释需在独立区域操作，避免污染。

阳性对照为DNA片段，不含活体病原体。

实验废弃物需按生物安全规范处理。

技术参数

检测范围：定量分析时线性范围≥5个数量级。

保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

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