兔E-cadherin/CD324/CDHelisa试剂盒 新品

兔E-cadherin/CD324/CDHelisa试剂盒

产品简介:

兔E-cadherin/CD324/CDH ELISA试剂盒是专为定量检测兔样本（如血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等）中E-cadherin（CD324/CDH1）蛋白含量而设计的试剂盒。E-cadherin是一种钙依赖型细胞粘附分子，主要参与细胞间粘附及组织结构维持，其表达异常与肿瘤发生、转移及预后密切相关。

检测原理

采用双抗体夹心ELISA法：酶标板上预包被抗兔E-cadherin特异性抗体，样本中的E-cadherin与抗体结合后，加入酶标二抗，形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”复合物，通过底物显色，颜色深浅与E-cadherin浓度成正比。

试剂盒组成（典型）

预包被E-cadherin抗体的酶标板

E-cadherin标准品

酶标抗体（如HRP标记）

样本稀释液

洗涤液

显色底物（TMB）

终止液

操作步骤

样本准备：按需做复孔，样本建议提前平衡至室温。

加样：加入标准品和待测样本，37℃孵育1-2小时。

洗涤：洗板3-5次，去除未结合物质。

加酶标二抗：37℃孵育45-60分钟。

显色与终止：加入底物避光反应，终止液终止反应。

读数：酶标仪450 nm测定吸光度，依据标准曲线计算E-cadherin浓度。

注意事项

严格按说明书操作，避免交叉污染和非特异性结合。

样本避免反复冻融，未用完的板条密封冷藏（2-8℃）。

试剂盒不同批号组分不可混用，标准品建议一次性使用。

血浆、血清及组织样本需规范处理，避免溶血和杂质干扰。

应用领域

用于兔肿瘤、炎症、组织损伤修复等疾病机制研究。

支持细胞生物学、病理学及免疫学等多领域科研实验。

常见问题解答 (FAQ)

Q1: 为什么要做“复孔”？

A: 建议每个样本（包括标准品）都做复孔（2-3个孔）。这样可以计算平均值，减少操作误差，提高数据的可信度。

Q2: 样本需要稀释吗？

A: 是的。如果样本浓度过高，超出了标准曲线的检测范围，需要根据预实验结果进行适当稀释。计算最终浓度时，记得乘以稀释倍数。

Q3: 结果出现“花板”（背景不均）怎么办？

A: 可能原因包括：洗板不干净、温育温度不均、加样时产生气泡、或者试剂（如底物）受光照分解。请检查洗板机是否堵塞，确保温育箱温度恒定。

公司正在出售的产品：

稀释线性实验 (Linearity)：

操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。

预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。

干扰实验 (Interference Test)：

操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。

预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。

回收实验 (Recovery Test)：

操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。

预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。