兔ANGPTL4elisa试剂盒 新品

产品介绍：

兔ANGPTL4 ELISA试剂盒 用于定量检测兔血清、血浆、细胞培养上清或其他体液中的 血管生成素样蛋白4（Angiopoietin-like 4, ANGPTL4）。ANGPTL4是一种代谢调节蛋白，参与脂质代谢、糖代谢、血管生成及炎症反应，与肥胖、糖尿病、心血管疾病和肿瘤相关。

2. 检测原理

采用 双抗体夹心ELISA法（Sandwich ELISA）：

预包被抗体：微孔板上固定有抗兔ANGPTL4特异性抗体。

样本结合：样本中的ANGPTL4与捕获抗体结合。

检测抗体：加入HRP标记的抗兔ANGPTL4二抗，形成复合物。

显色反应：TMB底物经HRP催化显色，OD值与ANGPTL4浓度成正比。

3. 主要应用

代谢研究：探究ANGPTL4在兔模型中的脂代谢、糖代谢调控作用。

疾病机制：研究其在动脉粥样硬化、胰岛素抵抗或肿瘤微环境中的作用。

药物开发：评估药物对ANGPTL4表达的影响。

4. 试剂盒组成

组分  规格/数量

预包被抗兔ANGPTL4微孔板  96孔（可拆）

兔ANGPTL4标准品  0-50 ng/mL（冻干或液体）

HRP标记检测抗体  1瓶（浓缩或即用）

TMB显色液  1瓶（避光保存）

终止液（2M H?SO?）  1瓶

洗涤缓冲液（20X）  1瓶（需1:20稀释）

样本稀释液  1瓶（PBS或类似缓冲液）

5. 操作步骤（简化版）

标准品复溶：用稀释液配制梯度浓度（如0、5、10、20、50 ng/mL）。

加样：标准品、待测样本各100μL/孔，37℃孵育1-2小时。

洗涤：用1X洗涤液洗板3-5次。

加检测抗体：加入HRP标记抗体，37℃孵育30-60分钟。

显色：加入TMB，避光反应10-15分钟。

终止与检测：加终止液，450nm测OD值（参考波长630nm）。

6. 关键性能参数

检测范围：通常 0.1-50 ng/mL。

灵敏度：最低检测限（LOD）≤0.1 ng/mL。

特异性：不与兔其他ANGPTL家族蛋白（如ANGPTL3、ANGPTL6）交叉反应。

精密度：板内/板间CV <10%。

主要优点缺点

维度  优势 (Pros) 劣势 (Cons)

检测性能   灵敏度极高，特异性强，结果准确  可能存在交叉反应，易受干扰物影响

操作体验   流程标准化，无需昂贵设备，适合高通量检测   步骤多且繁琐，耗时较长，对操作技巧有要求

经济成本   适合大批量样本检测，长期看性价比尚可   单次试剂成本较高，且不同批次可能存在差异

应用范围   可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本   对样本质量（如是否溶血）敏感

公司正在出售的产品：

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。