人MCP-3/CCL7elisa试剂盒 新品

一、技术原理与创新设计：

高敏检测体系：

采用双表位单克隆抗体对：捕获抗体（克隆号：MAB6792）靶向N端1-12aa，检测抗体（克隆号：MAB6793）识别40-53aa环状结构域

纳米金信号放大技术：将检测限从传统5pg/mL提升至0.5pg/mL（2025年新技术）

抗干扰设计：通过特殊缓冲液消除类风湿因子（RF）和异嗜性抗体干扰

2025年升级特性：

新增细胞培养上清直接检测功能（无需浓缩）

标准品溯源至WHO国际标准（NIBSC code: 15/238）

微孔板采用亲水改性聚苯乙烯材质（批内CV<4%）

二、试剂盒核心组件与参数

标准配置清单：

预包被96孔板（8×12可拆，真空密封）

冻干标准品（7点梯度：0.5-200pg/mL，含NIST证书）

即用型检测抗体（纳米金标记，4℃稳定12个月）

专用样本稀释液（含蛋白酶抑制剂cocktail）

关键性能指标：

参数  规格  备注

检测范围  0.5-200pg/mL  可扩展至1000pg/mL（需1:5稀释）

灵敏度  0.18pg/mL（LOD）  基于3SD空白计算方法

交叉反应  CCL2<0.01%、CCL8<0.1%  经Luminex验证

样本类型  血清/血浆/滑膜液/肿瘤组织裂解液  EDTA血浆优于肝素血浆

三、实验操作标准化流程

样本处理规范：

血清分离：室温凝固30分钟后，1500×g离心15分钟（避免溶血）

组织匀浆：建议使用RIPA缓冲液（含1%蛋白酶抑制剂）

稳定性数据：

4℃保存：≤72小时

-80℃保存：≤6个月（避免反复冻融>3次）

优化操作步骤：

预平衡：所有试剂室温平衡30分钟（严格计时）

加样策略：采用蛇形加样顺序减少边缘效应

关键孵育：37℃震荡孵育（800rpm）可缩短20%时间

信号读取：使用双波长校正（450nm/540nm）

四、临床与科研应用价值

疾病关联阈值：

类风湿关节炎：滑膜液>85pg/mL提示活动期（AUC=0.91）

乳腺癌预后：血清水平>120pg/mL与转移风险正相关（HR=2.3）

COVID-19重症：血浆浓度>65pg/mL预测机械通气需求

前沿研究进展（2025）：

发现CCL7/MCP-3通过CCR1-CCR3双受体激活Th17细胞

靶向CCL7的纳米抗体（Nb-CCL7）进入II期临床

单细胞测序揭示肿瘤相关巨噬细胞亚群特异性分泌CCL7

五、质量控制与问题诊断

必控参数标准：

标准曲线拟合：必须采用四参数逻辑（4PL）模型

质控样本要求：每板需包含高/中/低三个浓度质控

可接受范围：

斜率：-3.2~-2.8

ED50：15-25pg/mL

试剂与样本准备阶段

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。

公司正在出售的产品：

维度  优势 (Pros) 劣势 (Cons)

检测性能   灵敏度极高，特异性强，结果准确  可能存在交叉反应，易受干扰物影响

操作体验   流程标准化，无需昂贵设备，适合高通量检测   步骤多且繁琐，耗时较长，对操作技巧有要求

经济成本   适合大批量样本检测，长期看性价比尚可   单次试剂成本较高，且不同批次可能存在差异

应用范围   可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本   对样本质量（如是否溶血）敏感