人B7-H1/PD-L1elisa试剂盒 新品

人B7-H1/PD-L1elisa试剂盒

产品简介:

人B7-H1/PD-L1 ELISA试剂盒用于定量检测人体样本（如血清、血浆或细胞培养上清）中的B7-H1（程序性死亡配体1，PD-L1）蛋白水平。PD-L1在免疫调节、肿瘤免疫逃逸及炎症反应中具有重要作用，是免疫检查点研究领域的关键靶点。

检测原理

采用双抗体夹心法ELISA技术：

捕获抗体：微孔板预包被抗PD-L1抗体，特异性结合样本中的PD-L1；

检测抗体：加入生物素标记的抗PD-L1抗体，与捕获的PD-L1结合形成免疫复合物；

酶标记物：加入HRP标记的链霉亲和素，与生物素结合；

显色反应：加入TMB底物，酶催化显色，颜色深浅与PD-L1浓度正相关，通过酶标仪测定吸光度（OD值）计算浓度。

核心组件

预包被抗体板：已包被抗PD-L1抗体的96孔板；

标准品：不同浓度的重组人PD-L1，用于绘制标准曲线；

检测抗体：生物素标记的抗PD-L1抗体；

酶标记物：HRP标记的链霉亲和素；

底物溶液：TMB显色液；

终止液：用于终止反应，通常为硫酸溶液。

检测流程

加样：加入标准品、样本和检测抗体；

温育：促进抗原抗体反应；

洗涤：去除未结合成分；

显色：加入底物溶液，观察颜色变化；

终止：加入终止液，停止反应；

读数：酶标仪测定OD值，计算PD-L1浓度。

应用价值

肿瘤免疫研究：PD-L1在多种肿瘤中高表达，通过与PD-1结合抑制T细胞活性，介导肿瘤免疫逃逸。检测PD-L1水平有助于研究肿瘤免疫机制及评估免疫检查点抑制剂（如抗PD-1/PD-L1抗体）的治疗效果

自身免疫疾病研究：PD-L1参与调控免疫耐受，在系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等疾病中表达异常，检测其水平有助于揭示疾病机制。

移植免疫研究：PD-L1在器官移植中的免疫调节作用备受关注，检测其表达水平可为移植排斥反应的研究提供参考。

炎症反应研究：PD-L1在慢性炎症性疾病（如炎症性肠病、肝炎）中的作用机制研究中具有重要价值。

应用与服务

该试剂盒广泛应用于生物医学研究领域，如机制研究、疾病标志物检测等。部分厂家提供免费代测服务和专业技术支持，方便用户获得准确可靠的实验结果。

操作要点：

需严格遵守试剂盒说明书操作，建议做复孔及标准曲线。

洗涤过程至关重要，洗涤不充分会影响结果准确性。

所有试剂使用前需恢复至室温，避免批号混用。

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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：

稀释线性实验 (Linearity)：

操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。

预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。

干扰实验 (Interference Test)：

操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。

预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。

回收实验 (Recovery Test)：

操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。

预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。

注意事项

试剂盒组分应按说明储存，使用前平衡至室温。

实验中需避免交叉污染，建议使用一次性吸头。

充分混匀对实验结果至关重要。

试剂盒仅供研究使用，不可用于临床诊断。

显色液需避光保存，终止液为2M硫酸，操作时需安全防护。