大鼠瘦素(Leptin)ELISA试剂盒 新品

大鼠瘦素(Leptin)ELISA试剂盒

产品简介:

大鼠瘦素（Leptin）ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆及其他相关生物液体中瘦素（Leptin）含量的科研试剂盒。瘦素是由脂肪细胞分泌的一种蛋白质类激素，主要参与调节能量平衡、抑制食欲、增加能量消耗，并在脂肪代谢和体重控制中发挥关键作用。

检测原理

试剂盒通常采用双抗体夹心法酶联免疫吸附测定（ELISA）技术：

抗大鼠Leptin的特异性抗体预包被在酶标板上；

样本中的Leptin与包被抗体结合，再加入生物素化检测抗体和HRP标记的链霉亲和素，形成免疫复合物；

洗涤后加入显色底物TMB，产生颜色反应，颜色深浅与Leptin浓度成正比；

在450 nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样本中Leptin的浓度。

主要特点

检测范围广：不同品牌试剂盒检测范围略有差异，常见为0.16–10 ng/mL或100–6,400 pg/mL；

高灵敏度：最低可检测至0.1 ng/mL或67.2 pg/mL；

特异性强：与大鼠Leptin类似物无明显交叉反应；

重复性好：板内和板间变异系数通常小于10%；

适用样本类型多：包括血清、血浆（EDTA/肝素抗凝）、细胞培养上清、组织匀浆等。

操作流程概要

样本准备：血清、血浆等需按规范离心收集，组织样本需制备匀浆并离心取上清；

试剂平衡：所有试剂使用前需恢复至室温（20–25℃）；

加样与孵育：将标准品和待测样本加入酶标板，37℃孵育一定时间；

洗涤：多次洗涤去除未结合物质；

显色与终止：加入TMB显色液避光显色，再加终止液终止反应；

读数与计算：在450 nm处测定OD值，绘制标准曲线并计算浓度。

注意事项

避免样本溶血或污染，NaN?会抑制HRP活性，应避免使用含的样本；

不同批次试剂不可混用，未使用完的酶标板应密封保存于2–8℃；

实验过程中需设置标准曲线和复孔，以保证结果准确性。

应用领域

该试剂盒广泛应用于肥胖、糖尿病、代谢综合征、内分泌调控等科研领域，可用于评估瘦素水平变化及其与疾病的关系。

应用与服务

该试剂盒广泛应用于生物医学研究领域，如机制研究、疾病标志物检测等。部分厂家提供免费代测服务和专业技术支持，方便用户获得准确可靠的实验结果。

操作要点：

需严格遵守试剂盒说明书操作，建议做复孔及标准曲线。

洗涤过程至关重要，洗涤不充分会影响结果准确性。

所有试剂使用前需恢复至室温，避免批号混用。

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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：

稀释线性实验 (Linearity)：

操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。

预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。

干扰实验 (Interference Test)：

操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。

预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。

回收实验 (Recovery Test)：

操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。

预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。

注意事项

试剂盒组分应按说明储存，使用前平衡至室温。

实验中需避免交叉污染，建议使用一次性吸头。

充分混匀对实验结果至关重要。

试剂盒仅供研究使用，不可用于临床诊断。

显色液需避光保存，终止液为2M硫酸，操作时需安全防护。