大鼠CCL-5/RANTESelisa试剂盒 新品

产品介绍：

一、试剂盒基本信息

检测目标

CCL-5/RANTES：一种CC类趋化因子，主要由T细胞、血小板和内皮细胞分泌，参与炎症反应、免疫细胞招募（如T细胞、单核细胞）及病毒感染（如HIV）的病理过程。

种属特异性：适配大鼠样本（需验证与小鼠或人CCL-5的交叉反应性）。

适用样本

血清、血浆（推荐肝素抗凝）、组织匀浆（如肺、肝脏）、支气管肺泡灌洗液（BALF）、细胞培养上清液。

二、实验原理与步骤

核心原理

双抗体夹心法ELISA：

微孔板预包被抗大鼠CCL-5单抗 → 样本中CCL-5与抗体结合 → 生物素化检测抗体标记 → HRP-链霉亲和素催化显色（450 nm定量）。

关键步骤

样本稀释（避免高浓度样本超出线性范围） → 孵育（2小时，室温或37℃） → 洗涤（严格避免残留） → 显色（TMB，避光10–20分钟） → 终止 → 读值。

三、主要应用场景

炎症与免疫研究

哮喘或肺炎模型：评估CCL-5在嗜酸性粒细胞募集中的作用。

病毒感染机制

HIV或冠状病毒研究：检测CCL-5对病毒的调控。

心血管疾病

动脉粥样硬化：分析其促进单核细胞黏附血管内膜的效应。

四、操作注意事项

样本处理

血浆样本需避免血小板激活（可能释放CCL-5）；组织样本建议快速冷冻保存。

干扰因素

溶血或脂血样本需离心过滤；避免反复冻融（≤3次）。

五、补充说明

数据解读：建议结合其他趋化因子（如CCL2/MCP-1）或细胞因子（IL-6、TNF-α）进行多因子分析。

技术对比：若需检测活性而非浓度，可选用趋化实验（如Transwell迁移 assay）。

ELISA试剂盒的主要优点缺点

维度  优势 (Pros) 劣势 (Cons)

检测性能   灵敏度极高，特异性强，结果准确  可能存在交叉反应，易受干扰物影响

操作体验   流程标准化，无需昂贵设备，适合高通量检测   步骤多且繁琐，耗时较长，对操作技巧有要求

经济成本   适合大批量样本检测，长期看性价比尚可   单次试剂成本较高，且不同批次可能存在差异

应用范围   可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本   对样本质量（如是否溶血）敏感

公司正在出售的产品：

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。