大鼠Angiopoeitin-2(ANG-2)elisa试剂盒 新品

大鼠Angiopoeitin-2(ANG-2)elisa试剂盒

产品简介:

一、试剂盒基本信息

检测目标

特异性定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆或细胞培养上清中的 ANG-2（一种关键血管生成调节因子，参与血管稳定性、炎症和肿瘤微环境调控）。

检测原理

双抗体夹心ELISA法：

预包被抗大鼠ANG-2抗体捕获样本中的ANG-2；

生物素标记的二抗与ANG-2结合；

HRP-链霉亲和素系统催化TMB显色，OD值与ANG-2浓度正相关。

二、核心组分与规格（以主流品牌为例）

组分  说明

预包被96孔微孔板  抗大鼠ANG-2单克隆抗体

重组大鼠ANG-2标准品  浓度梯度（通常0-500 pg/mL）

生物素化检测抗体  高亲和力，低交叉反应性

HRP-链霉亲和素浓缩液  信号放大系统

TMB显色底物 & 终止液  终止后黄色，450nm读数

样本稀释液 & 洗涤液  优化缓冲体系，减少背景干扰

三、技术特点与优势

高灵敏度

高特异性

经交叉实验验证，不与大鼠ANG-1、VEGF等血管因子交叉反应。

宽线性范围

标准曲线范围通常为 15.6-1000 pg/mL，覆盖生理和病理浓度。

快速高效

总耗时约 3.5小时（含孵育和显色步骤），支持高通量筛选。

四、典型应用场景

血管生成研究

肿瘤、缺血性疾病（如心肌梗死）或糖尿病视网膜病变中ANG-2的动态变化。

炎症与免疫调控

脓毒症、关节炎等模型中ANG-2与血管渗漏的关联分析。

药物开发

抗血管生成药物或ANG-2抑制剂的效果评价。

五、操作关键注意事项

样本处理

血清/血浆：建议使用EDTA抗凝，避免溶血；离心后分装保存于-80℃。

组织样本：需匀浆后离心取上清，蛋白浓度建议调整至1-2 mg/mL。

标准曲线拟合

推荐使用四参数逻辑（4-PL）曲线拟合，提高低浓度准确性。

质量控制

每板设置复孔、空白孔及阳性对照，CV值应＜15%。

应用与服务

该试剂盒广泛应用于生物医学研究领域，如机制研究、疾病标志物检测等。部分厂家提供免费代测服务和专业技术支持，方便用户获得准确可靠的实验结果。

操作要点：

需严格遵守试剂盒说明书操作，建议做复孔及标准曲线。

洗涤过程至关重要，洗涤不充分会影响结果准确性。

所有试剂使用前需恢复至室温，避免批号混用。

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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：

稀释线性实验 (Linearity)：

操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。

预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。

干扰实验 (Interference Test)：

操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。

预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。

回收实验 (Recovery Test)：

操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。

预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。

注意事项

试剂盒组分应按说明储存，使用前平衡至室温。

实验中需避免交叉污染，建议使用一次性吸头。

充分混匀对实验结果至关重要。

试剂盒仅供研究使用，不可用于临床诊断。

显色液需避光保存，终止液为2M硫酸，操作时需安全防护。