大鼠肾足蛋白(NPHN)ELISA试剂盒 新品

大鼠肾足蛋白(NPHN)ELISA试剂盒

产品简介:

大鼠肾足蛋白（NPHN）ELISA试剂盒是一种用于定量检测大鼠尿液、血清、组织匀浆、细胞培养上清等生物样本中肾足蛋白（NPHN）浓度的科研工具，广泛应用于肾脏疾病、糖尿病肾病、妊娠高血压等领域的研究。

检测原理

试剂盒采用双抗体夹心ELISA法——

酶标板微孔包被有抗NPHN抗体，样本中的NPHN与抗体结合；

加入生物素标记的检测抗体，形成夹心复合物；

洗涤后加入HRP标记的亲和素，与生物素结合；

加入TMB显色底物，HRP催化产生蓝色，在酸性条件下变为黄色；

450 nm波长下测定吸光度，颜色深浅与NPHN浓度呈正相关，通过标准曲线计算浓度

2. 主要参数

检测范围：常见为0.156-10 ng/mL或0.313-20 ng/mL，不同品牌有所差异

灵敏度：最低检测限可达0.055-0.112 ng/mL

特异性：仅识别大鼠NPHN，与其他类似物无明显交叉反应

样本类型：尿液、血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清等

保存条件：2-8℃冷藏保存，避免反复冻融，试剂盒有效期一般为6个月至1年

3. 操作步骤（简要）

从冷藏环境中取出试剂盒，平衡至室温

设置标准品孔和样本孔，加入相应试剂

37℃孵育1-2小时，抗原抗体充分结合

洗涤酶标板3-5次，去除未结合物质

加入酶标检测抗体，37℃再孵育30-60分钟

洗涤后加TMB显色，避光反应10-20分钟

加终止液，酶标仪450 nm读数，绘制标准曲线计算浓度

4. 注意事项

避免样本溶血及反复冻融，样本如不能立即检测可分装-20℃保存

试剂盒仅供科研使用，不用于临床诊断

不同批号试剂不可混用，所有试剂使用前需摇匀

洗涤过程需彻底，避免交叉污染和板内干燥

显色底物TMB需避光保存，使用前配制

应用与服务

该试剂盒广泛应用于生物医学研究领域，如机制研究、疾病标志物检测等。部分厂家提供免费代测服务和专业技术支持，方便用户获得准确可靠的实验结果。

操作要点：

需严格遵守试剂盒说明书操作，建议做复孔及标准曲线。

洗涤过程至关重要，洗涤不充分会影响结果准确性。

所有试剂使用前需恢复至室温，避免批号混用。

如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：

稀释线性实验 (Linearity)：

操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。

预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。

干扰实验 (Interference Test)：

操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。

预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。

回收实验 (Recovery Test)：

操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。

预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。

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注意事项

试剂盒组分应按说明储存，使用前平衡至室温。

实验中需避免交叉污染，建议使用一次性吸头。

充分混匀对实验结果至关重要。

试剂盒仅供研究使用，不可用于临床诊断。

显色液需避光保存，终止液为2M硫酸，操作时需安全防护。