大鼠肾病蛋白(NPHN)ELISA试剂盒 新品

大鼠肾病蛋白(NPHN)ELISA试剂盒

产品简介:

大鼠肾病蛋白(NPHN)ELISA试剂盒是一种专门用于定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清液及其他相关生物液体中肾病蛋白(NPHN)浓度的科研工具。该试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附测定（ELISA），通过特异性抗体包被微孔板，加入待测样本和标准品，经孵育、洗涤后加入酶标二抗和显色底物，最终通过颜色深浅与NPHN浓度正相关进行定量分析。

检测原理

双抗体夹心法：用抗大鼠NPHN抗体包被酶标板，样本中的NPHN与抗体结合，加入生物素标记的检测抗体和HRP-链霉亲和素，形成免疫复合物。洗涤后加入TMB显色底物，酶促反应使溶液由蓝变黄，在450nm波长下测定吸光度（OD值），NPHN浓度与OD值成正比。

样本类型

血清、血浆（EDTA/肝素）、组织匀浆、细胞培养上清、尿液等

主要参数

检测范围：0.156-10 ng/mL（不同品牌略有差异）

灵敏度：最小可检测浓度达0.094-0.10 ng/mL

特异性：与其它类似物无明显交叉反应

重复性：板内、板间变异系数均<10%

试剂盒规格：通常为48T或

操作流程

样本和试剂准备：所有试剂使用前平衡至室温，样本需按规范处理避免溶血或污染。

加样与孵育：加入标准品和待测样本，37℃孵育一定时间。

洗涤：多次洗涤去除未结合物质。

显色与终止：加入显色底物避光反应，适时加入终止液。

读数与计算：酶标仪450nm测定OD值，根据标准曲线计算浓度。

保存条件与有效期

保存：2-8℃冷藏，切勿冻存

有效期：一般为6个月

应用与服务

该试剂盒广泛应用于生物医学研究领域，如机制研究、疾病标志物检测等。部分厂家提供免费代测服务和专业技术支持，方便用户获得准确可靠的实验结果。

操作要点：

需严格遵守试剂盒说明书操作，建议做复孔及标准曲线。

洗涤过程至关重要，洗涤不充分会影响结果准确性。

所有试剂使用前需恢复至室温，避免批号混用。

如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：

稀释线性实验 (Linearity)：

操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。

预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。

干扰实验 (Interference Test)：

操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。

预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。

回收实验 (Recovery Test)：

操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。

预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。

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注意事项

试剂盒组分应按说明储存，使用前平衡至室温。

实验中需避免交叉污染，建议使用一次性吸头。

充分混匀对实验结果至关重要。

试剂盒仅供研究使用，不可用于临床诊断。

显色液需避光保存，终止液为2M硫酸，操作时需安全防护。