大鼠内脂素/内脏脂肪素(VF)ELISA试剂盒 新品

产品介绍：

大鼠内脂素/内脏脂肪素(VF)ELISA试剂盒是专为定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞上清液等生物样本中内脂素（Visfatin，又称内脏脂肪素）含量而设计的科研用工具。该试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA），具有高灵敏度、高特异性和良好的重复性，广泛应用于代谢疾病、肥胖、糖尿病及相关炎症机制研究。

检测原理

微孔板预包被抗大鼠Visfatin抗体，样本中的Visfatin与抗体结合后，加入生物素标记的检测抗体和HRP标记的链霉亲和素，形成夹心复合物。加入TMB显色液后，HRP催化TMB生成蓝色产物，终止反应后变为黄色，颜色深浅与Visfatin浓度成正比。用酶标仪在450nm波长测定吸光度，通过标准曲线计算样品浓度。111213

主要组成

预包被抗体微孔板

Visfatin标准品

生物素化检测抗体

HRP-链霉亲和素

TMB显色液

终止液

洗涤缓冲液

样品稀释液

样本处理与保存

血清/血浆/组织匀浆/细胞上清：按说明书离心取上清，避免溶血和高血脂；样本可分装保存于-20℃

或-80℃，避免反复冻融

保存条件：试剂盒2-8℃冷藏保存，标准品-20℃保存，有效期约6个月

试剂盒特点

灵敏度高：最低检测限可达5-20 pg/mL（不同品牌有所差异）

特异性强：不与其它细胞因子或相关蛋白交叉反应

重复性好：板内和板间变异系数均小于10-15%

适用样本类型广：血清、血浆、组织、细胞等多种生物液体

注意事项

严格按说明书操作，避免污染

洗涤要充分

避免标本溶血

不用于临床诊断，仅用于科研

试剂与样本准备阶段

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。

注意事项

避免样本溶血和反复冻融，样本如不能立即检测建议分装-20℃保存

试剂盒仅供科研使用，不用于临床诊断

不同批号试剂不可混用，所有试剂使用前需摇匀

洗涤过程需彻底，避免交叉污染和板内干燥

显色底物TMB需避光保存，使用前配制

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ELISA之所以被广泛应用，主要归功于以下几个核心优势：

灵敏度高（抓得准）：

它利用酶的催化放大作用，能将微弱的信号放大，因此可以检测到样本中极低浓度的目标物质（甚至达到皮克级 pg/mL）。哪怕样本里只有微量的病毒、激素或蛋白质，它也能“捕捉”到。

特异性强（瞄得准）：

基于抗原-抗体的特异性结合原理，试剂盒中的抗体通常只与目标物质反应，很少受样本中其他杂质的干扰。这大大降低了假阳性率，结果准确可靠。

操作简便且快速：

相比于一些复杂的仪器分析方法，ELISA的操作流程相对标准化。市面上的试剂盒通常是一套完整的组件，按照说明书进行加样、孵育、洗板、显色即可。整个过程通常在几小时内就能完成。

高通量与适用性广：

它通常采用96孔板或48孔板，一次实验可以同时处理几十个样本，非常适合大规模的流行病学筛查或批量科研实验。此外，它不仅能测蛋白，还能测抗体、激素、药物残留甚至农药，应用领域覆盖了医学、食品安全和环境监测。

安全稳定：

不像放射免疫法那样使用放射性同位素，ELISA使用的是酶标记，对人体和环境无辐射危害，且试剂保存时间较长。