多噬伯克霍尔德氏菌 新品

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多噬伯克霍尔德氏菌（Burkholderia multivorans）是伯克霍尔德氏菌属的革兰氏阴性杆菌，具单极或双极鞭毛，运动活泼，严格好氧。广泛分布于土壤、水体及医院环境中，能分解利用多种有机物（包括难降解化合物），具有生物修复潜力。是医院获得性感染的重要病原菌，可引起肺部感染、败血症、泌尿系统感染等，尤其对囊性纤维化患者危害严重；对多种抗生素具有耐药性，治疗难度大。
培养基  胰蛋白胨：15.0，大豆胨：5.0，氯化钠：5.0，琼脂：15.0，pH：7.3±0.2(25℃)

生长条件  30℃；18-24h；好氧

存储条件  2-8℃

安全等级  2

形态  菌落直径为1-2mm，圆形，边缘整齐，不透明，正面淡黄色，反面黄色，中间凸起，表面光滑，质地湿润，易挑起，不产色素，G－（红），杆菌，纯度：纯

分离基物  Clinical specimen - human, Cystic fibrosis patient, Belgium, 1992

模式菌株  yes

操作步骤  ①准备上述平板 1-2 块；②安瓿管表面消毒后在安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；③吸取 0.5mL 无菌水打入冻干管，充分溶解菌粉后，打入平板中 200μL/个，涂布均匀；④将平板置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。

共享方式  公益性共享

低温保存法：

1.简单保存法，将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1～2个月，若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3～4个月。

2.液氮超低温保存法，将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中，密封于安瓿管内，然后控制冷却速度，使安瓿管温度逐步下降至-35℃时，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物，都可用此法长期保存。

菌种的使用范围:

（1）合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚，酿酒酵母菌组成成分精确，重复性强，而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏（Czapek）培养基等。

（2）天然培养基。由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，培养效果好，所以常被采用。

（3）半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。

传代与使用规范:

传代原则：活化后先分离单菌落，确保纯度；传代≤5 代，防止菌种退化、产量下降

工作种子：斜面活化→单菌落纯化→斜面保藏，作为连续 3–5 代的工作种子

发酵接种：孢子悬液接种量5%–10%（v/v），种子液菌龄 24–48 h（对数生长期）

禁止：直接用原始冻干管多次传代；用于致病性实验（BSL‑1 以外操作需审批）

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