大肠埃希氏菌（尿路致病性） 新品

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尿路致病性大肠埃希氏菌（Uropathogenic Escherichia coli, UPEC）是引起泌尿系统感染最常见的病原菌，属于大肠埃希氏菌的致病性菌株。该菌具有多种黏附因子，如菌毛、黏附素等，能紧密黏附于泌尿道上皮细胞，抵抗尿液冲刷和宿主免疫防御机制，引发尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎等感染。患者主要表现为尿频、尿急、尿痛等尿路刺激症状，严重时可导致败血症、肾功能衰竭等并发症。治疗通常选用抗生素，但部分菌株已产生耐药性，增加了治疗难度。
培养基  蛋白胨：10.0，牛肉粉：3.0，氯化钠：5.0，琼脂：15.0，pH值：7.3±0.1(25℃)

生长条件  37℃；18-24h；好氧

存储条件  2-8℃

安全等级  2

形态  菌落直径为1-2mm，圆形，边缘整齐，不透明，正面黄色，颜色较浅，中间凸起，表面明亮，表面光滑，质地湿润，易挑起，G－（红），杆菌

分离基物  患有急性肾盂肾炎的女性的血液和尿液（临床标本）

模式菌株  no

操作步骤  ①准备1支含有5~10mL液体培养基的试管和2个平板；②安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；③吸取0.5mL液体培养基打入冻干管，充分溶解后重新打回液体试管中，混匀；④吸取0.2mL菌悬液打入平板中，涂布均匀，重复两次获得两个平板；⑤将液体试管和平板全部置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。

应用领域  生物信息学、肠道疾病研究、传染病研究，pks阳性

共享方式  公益性共享

菌种标准操作步骤:

一、准备工作

穿实验服、戴手套、口罩，在超净工作台内操作。

灭菌：培养基、枪头、离心管、接种环 / 针、生理盐水。

工作台紫外照射20–30 min，通风后开始。

二、菌种活化

取冻存菌种 / 安瓿菌种，室温 / 冰上缓慢解冻。

接种环火焰灭菌，冷却后蘸取少量菌液。

在固体培养基（如 LB、营养琼脂）上划线分离。

倒置培养：

细菌：37℃，12–24 h

真菌：28℃，48–72 h

三、挑单克隆扩大培养

挑取形态一致、边缘整齐的单菌落。

接种到液体培养基或新鲜斜面。

摇床 / 静置培养至对数生长期（OD 合适、浑浊）。

四、菌种传代

取少量菌液 / 菌落，接种到新培养基。

控制传代次数，避免多次传代导致性状退化。

每次传代做好记录：日期、代数、操作人、生长情况。

实验后处理:

菌种保存

将实验后的菌种进行冻存（如-80°C甘油保存或液氮保存）。

记录保存信息，便于后续使用。

废弃物处理

将实验废弃物（如培养基、菌液）进行高温灭菌处理。

按照实验室规定分类处理废弃物，避免环境污染。

实验总结

撰写实验报告，总结实验过程、结果及结论。

分析实验中的问题与改进措施。

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