大斑凸脐蠕孢

商品属性：

产品描述：

大斑凸脐蠕孢（Exserohilum turcicum）是凸脐蠕孢属的一种半知菌亚门真菌，是玉米大斑病的主要病原菌。该菌主要危害玉米叶片，初期叶片出现水渍状青灰色斑点，后逐渐扩展为大型梭形病斑，颜色变为黄褐色或灰褐色，严重时病斑连片，导致叶片干枯死亡，影响玉米产量。病菌以菌丝体和分生孢子在病残体上越冬，通过气流传播，在高温高湿环境下易流行，防治需采取选用抗病品种、合理密植、及时清除病残体及化学药剂防治等综合措施。
培养基  马铃薯浸粉：10.0，葡萄糖：20.0，KH2PO4：3.0，MgSO4·7H2O：1.5，硫胺素：0.008，琼脂：15.0，pH：6.0±0.2（25℃）

生长条件  28℃，5-7天，好氧

存储条件  -80℃

安全等级  1

形态  丝状真菌，在综合 PDA 培养基上菌层明显，菌丝灰色，密集旺盛，向平板边缘蔓延生长，不产孢子。

分离基物  玉米叶片

模式菌株  no

操作步骤  ①将冻存管进行水浴（霉菌30℃，细菌37℃）溶解，快速振摇溶解；②使用酒精棉擦拭冻存管外壁消毒，随后转移至安全柜操作；③旋开管盖，将溶解液全部吸出，打入1-2个琼脂平板（每块平板约200μL）；④涂布均匀后转移至上述培养条件下培养。

应用领域  进行分析检测及抗病性鉴定，指导生产。

共享方式  公益性共享

复活步骤:

甘油管冻存菌株复活

超净工作台内，用无菌移液器吸取1-2ml适宜的液体培养基至无菌试管中。

用无菌枪头吸取0.1-0.2ml冻存菌株菌液，加入上述液体培养基中，轻轻吹打混匀。

试管封口后，置于对应温度的恒温摇床（细菌180-220rpm，真菌120-150rpm）中培养12-24小时，或静置培养箱中培养24-48小时，至培养基出现明显浑浊。

取少量复苏后的菌液，涂布于固体培养基平板上，倒置培养至单菌落长出，后续可进行纯化保存。

冻干管菌株复活

超净工作台内，用75%酒精擦拭冻干管外壁，火焰灼烧管口（注意避免灼伤），然后用无菌镊子轻轻敲开冻干管。

吸取0.5-1ml无菌液体培养基，缓慢加入冻干管中，轻轻振荡使冻干菌粉完全溶解。

将溶解后的菌液全部转移至装有5-10ml液体培养基的无菌三角瓶中，充分混匀。

三角瓶封口后，置于最适温度的摇床或培养箱中培养，培养时间根据菌株类型调整（细菌12-24小时，真菌24-72小时）。

待培养基浑浊后，取菌液涂布固体平板，进行单菌落分离纯化。

准备工作：

环境与器材消毒：

在生物安全柜或超净工作台中操作。提前打开紫外灯照射30分钟。

准备75%酒精喷洒双手和工作台面。

准备所需器材：无菌接种环、酒精灯、无菌吸管、涂布棒、试管架、打火机等。

培养基准备：

根据菌种类型选择合适的培养基（如营养琼脂、血平板、LB培养基等）。

将培养基从冰箱取出，恢复至室温或进行预热。

个人防护：

穿戴实验服、手套、口罩。需在生物安全柜中操作并佩戴护目镜。

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