盐酸克伦特罗快速检测试剂盒（ELISA法） 新品

试剂盒参数

中文名称：盐酸克伦特罗快速检测试剂盒（ELISA法）

品  牌：臻科研

检测方法：酶联免疫法

检测时间：3H

独特优势：灵敏度高、特异性强、重复性好

用 途 ：科研实验课题专用，不得用于临床诊断。

存 储 ：2～8℃保鲜冷藏，切勿冷冻

保质期 ：6个月;生产日期、有效期、生产批号见外包装。

订购我司任意一款ELISA试剂盒都可享受免费代测服务（代测确保数据真实可靠且保密不会透露给第三方），收到样本7个工作日出结果，具体可以咨询我司客服人员。）产品保证质量有任何质量问题包退换，欢迎大家前来选购。

原理及用途

本试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测组织、蜂蜜、鸡蛋等样本中的***，试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时，加入标准品或样品溶液，样本中的***和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗***抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样本吸光度值与其所含多西环素药物含量成负相关，与标准曲线比较即可得出样本中***的残留量。

试剂盒组成

酶标板………………………96孔

高浓度标准品溶液1瓶：（1ml/瓶）1.0ppm（高标准液有挥发性，需注意密封）

酶标记物（红盖）……………………11ml

抗体工作液（蓝盖）…………………5.5ml

底物液A（白盖）……………………6ml

底物液B（黑盖）……………………6ml

终止液（黄盖）………………………6ml

20×浓缩洗涤液（白盖）……………40ml

5×复溶液（黄盖） …………………50ml

说明书…………………………………1份

盖板膜…………………………………1张

自封袋…………………………………1个

 需要的器材和试剂

仪器：酶标仪、打印机、均质器 、氮气吹干装置、振荡器、离心机、刻度移液管、天平（感量0.01g）

微量移液器：单道20µl-200µl，100µl-1000µl、多道300µl

酶联免疫试验步骤

将所需试剂从4℃冷藏环境中取出，置于室温平衡30min以上, 洗涤液冷藏时可能会有结晶需恢复到室温以充分溶解，每种液体试剂使用前均须摇匀。取出需要数量的微孔板及框架，将不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。

实验开始前需配制标准品应用液；低浓度的标准品不稳定，需现配现用。

在0ppb的瓶中加复溶液3ml，0.05ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35ppb的瓶中分别加复溶液2ml，4.05ppb的瓶中加复溶液3ml。

标准液6：取1.0ppm高浓度标准品溶液12ul加入装有3ml 复溶液4.05ppb的瓶中，盖紧，混匀，浓度即为4.05ppb。

标准液5：取1ml标准液6加入装有2ml 复溶液1.35ppb的瓶中，盖紧，混匀，浓度即为1.35ppb。

标准液4：取1ml标准液5加入装有2ml 复溶液0.45ppb的瓶中，盖紧，混匀，浓度即为0.45ppb。

标准液3：取1ml标准液4加入装有2ml 复溶液0.15ppb的瓶中，盖紧，混匀，浓度即为0.15ppb。

标准液2：取1ml标准液3加入装有2ml 复溶液0.05ppb的瓶中，盖紧，混匀，浓度即为0.05ppb。

标准液1：直接使用复溶液，浓度即为0ppb。

1 编    号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。

2 加样反应：加标准品应用液或样本50µl/孔到各自的微孔中，然后加抗体工作液50µl/孔，轻轻振荡5秒混匀，37℃避光反应30分钟。

3 洗    涤：小心揭开盖板膜，甩去孔内液体，每孔加350ul工作洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，最后一次拍干。（用吸水纸拍干，拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破）。

4 加酶反应：加酶标记物100µl/孔，37℃避光反应30分钟。

5 洗    涤：同上

6 显    色：加底物液A 50µl/孔，再加底物液B 50µl/孔，轻轻振荡5秒混匀，37℃避光显色15分钟（若蓝色过浅，可适当延长反应时间）。

7 终    止：加终止液50µl/孔，轻轻振荡混匀，终止反应。

8 测吸光值：用酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值（建议用双波长450/630nm）。测定应在终止反应后10分钟内完成。

结果分析

 百分吸光率的计算

    标准液或样本的百分吸光率等于标准液或样本的百分吸光度值的平均值（双孔）除以第一个标准液（0ppb）的吸光度值，再乘以100%，即

A—标准溶液或样本溶液的平均吸光度值

A0—0ppb标准溶液的平均吸光度值

标准曲线的绘制与计算

    以标准液百分吸光率为纵坐标，对应的标准液浓度（ppb）的对数为横坐标，绘制标准液的半对数曲线图。将样本的百分吸光率代入标准曲线中，从标准曲线上读出样本所对应的浓度，乘以其对应的稀释倍数即为样本中待测物的实际浓度。

    若利用试剂盒专业分析软件进行计算，更便于大量样本的准确、快速分析。（欢迎来电索取）

注意事项

1 室温低于25℃或试剂及样本没有回到室温（25℃）会导致所有标准的OD值偏低。

2 在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。

3 混合要均匀，洗板要彻底，在ELISA分析中的再现性，很大程度上取决于洗板的一致性。

4 在所有孵育过程中，用盖板膜封住微孔板，避免光线照射。

5 不要使用过了有效期的试剂盒，不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。

6 显色液若有任何颜色表明变质，应当弃之。0标准的吸光度值小于0.5个单位（A450nm< 0.5 ）时，表示试剂可能变质。

7 反应终止液有腐蚀性，避免接触皮肤。

贮藏及保存期

储藏条件：试剂盒于2-8℃保存，避免冷冻。

保 质 期：该产品有效期为1年，生产日期见包装盒。