Recombinant Mouse CCL25 新品

操作要点：

电泳条件：使用15% SDS-PAGE凝胶，以提高对小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。

?转膜参数：采用湿转法，100 V、60–90分钟（4°C），使用PVDF膜（需甲醇预活化）。

?抗体选择：

一抗：抗CST3多克隆抗体（如兔源抗体），推荐稀释比为1:1000。

二抗：HRP标记的山羊抗兔IgG，稀释比1:10,000。

?显色方式：ECL化学发光法，预期条带位于?~13.4 kDa?处。

?内参建议：由于CST3分子量较小，可选用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作为内参，避免条带重叠。

产品概述：

CCL25是趋化因子CC家族的成员，其核心功能是作为G蛋白偶联受体CCR9的特异性配体，通过CCL25/CCR9信号轴介导细胞的定向迁移。它主要由胸腺上皮细胞和小肠上皮细胞选择性分泌，在T淋巴细胞的发育、分化及肠道黏膜免疫中发挥关键作用，特别是对小肠上皮内淋巴细胞（IEL）的归巢与维持至关重要。此外，研究表明该信号通路在T细胞急性淋巴细胞白血病（T-ALL）的耐药与转移中扮演重要角色，能够通过激活PI3K/Akt及Wnt/β-catenin等信号通路，促进肿瘤细胞的侵袭、极化及干性维持。

别名

A130072A22Rik, C-C motif chemokine 25, CCL 25, CCL25, CCL25_HUMAN, Chemokine (C C motif) ligand 25, Chemokine (CC motif) ligand 25, Chemokine C C motif ligand 25, Chemokine CC motif ligand 25, Chemokine TECK, Ck beta 15, Ckb 15, Ckb15, MGC125074, MGC150327, SCY A25, SCYA 25, SCYA25, Small inducible cytokine A25, Small inducible cytokine A25 isoform 1 precursor

宿主; E.Coli

表达区间; 24-144

分子量; 13.2 kDa

标签; N-terminal His Tag

纯度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses

应用; Western Blot, ELISA

性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4

溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex

存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.

使用说明：

复溶方法: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液（pH 7.4）溶解冻干粉，轻轻混匀至完全溶解。

应用建议:

实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测，作为抗原或标准品。

浓度调整: 根据实验需求稀释，避免高浓度导致非特异性结合。

安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜，遵循实验室生物安全规范。

重组表达原理：

基因克隆：从牛基因组中获取CST3基因的编码序列（对应氨基酸31–148），插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。

?宿主表达：将重组质粒转化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高，适合大规模生产。

蛋白纯化：利用His标签与镍柱亲和层析结合，实现高纯度（>95%）蛋白回收，再经透析或凝胶过滤去除杂质。

?冻干保存：加入海藻糖作为保护剂，冻干后可长期稳定储存，复溶后保持天然构象和生物活性。

公司正在出售的产品：

通常包括以下几个核心步骤：

基因克隆：首先，科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列（目的基因）。

构建载体：将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中，这个载体就像是一个运输工具，

能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。

转入宿主：将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中，这个过程称为“转化”或“转染”。

表达与培养：宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养，其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息，开始大量生产目标蛋白。

纯化：通过一系列复杂的生物化学方法（如层析技术），将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来，以获得高纯度的产品。