Recombinant Human XPC 新品

操作要点：

电泳条件?：使用15% SDS-PAGE凝胶，以提高对小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。

?转膜参数?：采用湿转法，100 V、60–90分钟（4°C），使用PVDF膜（需甲醇预活化）。

?抗体选择?：

一抗：抗CST3多克隆抗体（如兔源抗体），推荐稀释比为1:1000。

二抗：HRP标记的山羊抗兔IgG，稀释比1:10,000。

?显色方式?：ECL化学发光法，预期条带位于?~13.4 kDa?处。

?内参建议?：由于CST3分子量较小，可选用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作为内参，避免条带重叠。

产品概述：

XPC蛋白是核苷酸切除修复（NER）通路中的关键识别因子，尤其在全局基因组NER（GG-NER）中发挥核心作用。其核心功能是作为DNA损伤感应器，与hRAD23B和CETN2蛋白形成复合物，特异性地识别并结合受损的DNA双螺旋结构。一旦识别到损伤位点（如紫外线诱导的环丁烷嘧啶二聚体CPD或6-4光产物6-4PP），XPC复合物便招募TFIIH复合物到损伤位点，启动DNA解旋和后续的损伤切除与修复合成过程。XPC基因的突变会导致着色性干皮病（Xeroderma Pigmentosum），患者对紫外线极度敏感

别名

DNA repair protein complementing XP C cells, DNA repair protein complementing XP-C cells, DNA repair protein complementing XPC cells, p125, RAD4, Xeroderma pigmentosum complementation group C, Xeroderma pigmentosum group C complementing protein, Xeroderma pigmentosum group C protein, Xeroderma pigmentosum group C-complementing protein, Xeroderma pigmentosum group III, XP 3, XP C, XP group C, XP3, Xpc

宿主; E.Coli

表达区间; 496-734

分子量; 26.2 kDa

标签; N-terminal His Tag

纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE

应用; Western Blot, ELISA

性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4

溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex

存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.

使用说明：

复溶方法?: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液（pH 7.4）溶解冻干粉，轻轻混匀至完全溶解。

?应用建议?:

?实验用途?: 适用于Western Blot、ELISA等检测，作为抗原或标准品。

?浓度调整?: 根据实验需求稀释，避免高浓度导致非特异性结合。

?安全提示?: 操作时需佩戴手套和护目镜，遵循实验室生物安全规范。

重组表达原理：

基因克隆?：从牛基因组中获取CST3基因的编码序列（对应氨基酸31–148），插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。

?宿主表达?：将重组质粒转化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高，适合大规模生产。

?蛋白纯化?：利用His标签与镍柱亲和层析结合，实现高纯度（>95%）蛋白回收，再经透析或凝胶过滤去除杂质。

?冻干保存?：加入海藻糖作为保护剂，冻干后可长期稳定储存，复溶后保持天然构象和生物活性。

公司正在出售的产品：

通常包括以下几个核心步骤：

基因克隆：首先，科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列（目的基因）。

构建载体：将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中，这个载体就像是一个运输工具，

能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。

转入宿主：将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中，这个过程称为“转化”或“转染”。

表达与培养：宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养，其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息，开始大量生产目标蛋白。

纯化：通过一系列复杂的生物化学方法（如层析技术），将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来，以获得高纯度的产品。