Recombinant Human VCP 新品

操作要点：

电泳条件?：使用15% SDS-PAGE凝胶，以提高对小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。

?转膜参数?：采用湿转法，100 V、60–90分钟（4°C），使用PVDF膜（需甲醇预活化）。

?抗体选择?：

一抗：抗CST3多克隆抗体（如兔源抗体），推荐稀释比为1:1000。

二抗：HRP标记的山羊抗兔IgG，稀释比1:10,000。

?显色方式?：ECL化学发光法，预期条带位于?~13.4 kDa?处。

?内参建议?：由于CST3分子量较小，可选用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作为内参，避免条带重叠。

产品概述：

该蛋白属于AAA+ ATP酶家族（ATPases Associated with diverse cellular Activities），其核心功能是作为细胞内的“分子马达”，利用ATP水解产生的能量介导多种生物学过程。VCP通过与不同的辅因子（如UBXN1, p47等）结合，参与泛素-蛋白酶体系统（UPS）、内质网相关降解（ERAD）、自噬、膜融合及DNA损伤修复等关键通路。值得注意的是，VCP基因的突变与多种疾病密切相关，包括额颞叶痴呆（FTD）、肌萎缩侧索硬化症（ALS）以及多种癌症。在肿瘤治疗中

别名

15S Mg(2+) ATPase p97 subunit, 15S Mg(2+)-ATPase p97 subunit, ALS14, ATPase p97, CDC48, IBMPFD, MGC131997, MGC148092, MGC8560, p97, TER ATPase, TERA, TERA_HUMAN, Transitional endoplasmic reticulum ATPase, Valosin containing protein, Valosin-containing protein, VCP, Yeast Cdc48p homolog

宿主; E.Coli

表达区间; 1-589

分子量; 64.7 kDa

标签; N-terminal His Tag

纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE

应用; Western Blot, ELISA

性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4

溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex

存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.

使用说明：

复溶方法?: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液（pH 7.4）溶解冻干粉，轻轻混匀至完全溶解。

?应用建议?:

?实验用途?: 适用于Western Blot、ELISA等检测，作为抗原或标准品。

?浓度调整?: 根据实验需求稀释，避免高浓度导致非特异性结合。

?安全提示?: 操作时需佩戴手套和护目镜，遵循实验室生物安全规范。

重组表达原理：

基因克隆?：从牛基因组中获取CST3基因的编码序列（对应氨基酸31–148），插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。

?宿主表达?：将重组质粒转化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高，适合大规模生产。

?蛋白纯化?：利用His标签与镍柱亲和层析结合，实现高纯度（>95%）蛋白回收，再经透析或凝胶过滤去除杂质。

?冻干保存?：加入海藻糖作为保护剂，冻干后可长期稳定储存，复溶后保持天然构象和生物活性。

公司正在出售的产品：

通常包括以下几个核心步骤：

基因克隆：首先，科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列（目的基因）。

构建载体：将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中，这个载体就像是一个运输工具，

能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。

转入宿主：将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中，这个过程称为“转化”或“转染”。

表达与培养：宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养，其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息，开始大量生产目标蛋白。

纯化：通过一系列复杂的生物化学方法（如层析技术），将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来，以获得高纯度的产品。