BW25113大肠杆菌 新品

商品属性：

产品描述：

BW25113是大肠杆菌K-12衍生的菌株，是基因功能研究、代谢工程及合成生物学研究中的常用模式菌株。该菌株遗传背景明确，具有易于培养、生长速度快、基因操作简便等优点，其基因组经过部分改造，删除了一些非必需基因，减少了代谢负担，更适合进行基因敲除、敲入及异源基因表达等操作。常被用于构建基因缺失文库、研究基因功能、优化代谢途径以生产生物燃料、生物基化学品及药用蛋白等。
培养基  蛋白胨：10.0，牛肉粉：3.0，氯化钠：5.0，琼脂：15.0，pH值：7.3±0.1(25℃)

生长条件  37℃；18-24h；好氧

存储条件  2-8℃

安全等级  1

形态  菌落直径为2-4mm，圆形，边缘整齐，不透明，正面黄色，浅色，中间凸起，表面光滑，表面明亮，质地湿润，易挑起，不产色素，G－（红），杆菌，纯度：纯

模式菌株  no

操作步骤  ①准备2个平板；②安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；③吸取0.5mL无菌水打入冻干管，充分溶解后，混匀；④吸取0.2mL菌悬液打入平板中，涂布均匀，重复两次获得两个平板；⑤将平板全部置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。

共享方式  公益性共享

质量控制与纯度判断:

（一）合格标准

菌落：灰色绒状、褶皱、产孢均匀，无杂菌（无白色 / 黄色 / 红色异常菌落）

液体培养：菌丝球均匀、无黏壁、无异味，发酵液 pH 稳定在 6.5–7.5

镜检：孢子丝螺旋状、孢子形态正常，无酵母 / 细菌污染

（二）常见问题与解决

问题 原因 解决方法

不生长 / 生长慢 温度过低、培养基营养不足、孢子未活化 30℃培养；用 ISP‑2；延长复苏时间

菌落杂色 / 污染 操作无菌不达标、器材灭菌不彻底 严格无菌；121℃灭菌 30 min

产量低 菌种退化、培养基碳氮比不当、溶氧不足 重新活化原始菌种；提高淀粉比例；增加摇床转速

关键注意事项：

无菌操作核心：

接种环每次使用前后必须灼烧至红。

试管口、瓶口在打开和关闭前，需在酒精灯火焰上灼烧灭菌。

操作过程中不要说话或走动，避免气流扰动。

明确菌种特性：

操作前务必确认菌种的生物安全等级（1级或2级）。

确认其需氧类型（好氧/厌氧），厌氧菌操作需缩短暴露空气时间。

防止交叉污染：

不同菌种分开操作，或彻底消毒后再处理下一个。

标注清楚菌名、日期、代数。

废弃物处理：

所有接触过活菌的耗材（吸头、平板、试管）必须经高温高压灭菌后，方可按医疗废物处理。

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