Recombinant Human TFIIB 新品

重组蛋白（Recombinant Protein）：

是指利用重组DNA或RNA技术，在体外人工制造的蛋白质。

这项技术通过将编码特定目标蛋白的基因片段，插入到重组表达载体中，然后导入宿主细胞（如细菌、酵母、哺乳动物细胞等），

利用宿主细胞的“蛋白质工厂”来生产出大量的、具有特定生物学活性的蛋白质。

产品概述：

人源重组TFIIB（转录起始因子IIB，也称为通用转录因子TFIIB）是一种通过重组DNA技术在大肠杆菌（E. coli）中表达的、具有生物活性的人类转录因子，通常带有GST或His等标签，呈高纯度冻干粉形式。该蛋白是RNA聚合酶II介导的基因转录所必需的核心通用转录因子，在细胞核内与转录因子IID（TFIID）和IIA（TFIIA）形成稳定的DAB复合物，作为连接TFIID与RNA聚合酶II的“桥梁”，在转录起始位点的选择和前起始复合物的组装过程中扮演关键角色。TFIIB蛋白包含一个N端的锌指结构域（Z

别名

General transcription factor IIB, General transcription factor TFIIB, gtf2b, RNA polymerase II transcription factor IIB, S300 II, S300-II, TF IIB, TF2B, TF2B_HUMAN, TFIIB, Transcription initiation factor IIB

宿主; E.Coli

表达区间; 1-316

分子量; 34.7 kDa

标签; N-terminal His Tag

纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE

应用; Western Blot, ELISA

性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4

溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex

存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.

 使用说明：

复溶方法: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液（pH 7.4）溶解冻干粉，轻轻混匀至完全溶解。

?应用建议:

?实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测，作为抗原或标准品。

?浓度调整: 根据实验需求稀释，避免高浓度导致非特异性结合。

?安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜，遵循实验室生物安全规范。

重组表达原理：

基因克隆：从牛基因组中获取CST3基因的编码序列（对应氨基酸31–148），插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。

?宿主表达：将重组质粒转化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高，适合大规模生产。

?蛋白纯化：利用His标签与镍柱亲和层析结合，实现高纯度（>95%）蛋白回收，再经透析或凝胶过滤去除杂质。

?冻干保存?：加入海藻糖作为保护剂，冻干后可长期稳定储存，复溶后保持天然构象和生物活性。

公司正在出售的产品：

操作要点：

电泳条件：使用15% SDS-PAGE凝胶，以提高对小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。

?转膜参数：采用湿转法，100 V、60–90分钟（4°C），使用PVDF膜（需甲醇预活化）。

?抗体选择：

一抗：抗CST3多克隆抗体（如兔源抗体），推荐稀释比为1:1000。

二抗：HRP标记的山羊抗兔IgG，稀释比1:10,000。

?显色方式：ECL化学发光法，预期条带位于?~13.4 kDa?处。

?内参建议：由于CST3分子量较小，可选用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作为内参，避免条带重叠。

存储条件：

冻干状态: 存储于-20°C以下，可稳定保存长达12个月。

?复溶后: 在2-8°C下可保存1个月，需保持无菌环境。

?注意事项: 避免反复冻融，以防止蛋白降解或活性损失。