Recombinant Human RAD51 新品

重组蛋白生产流程：

通常包括以下几个核心步骤：

基因克隆：首先，科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列（目的基因）。

构建载体：将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中，这个载体就像是一个运输工具，

能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。

转入宿主：将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中，这个过程称为“转化”或“转染”。

表达与培养：宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养，其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息，开始大量生产目标蛋白。

纯化：通过一系列复杂的生物化学方法（如层析技术），将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来，以获得高纯度的产品。

产品概述：

在生化特性上，重组人RAD51具有DNA依赖性的ATP酶活性，能够在单链DNA（ssDNA）上组装形成核蛋白丝（Nucleoprotein filament），并催化其与同源双链DNA（dsDNA）的链交换反应，形成D-loop结构。研究表明，RAD51在染色质环境中具有重塑活性，能直接识别并结合核小体，协助修复因子接近损伤位点。在癌症研究中，RAD51备受关注，因其在多种肿瘤（如乳腺癌、白血病）中常出现过表达，导致肿瘤细胞对放化疗产生耐药性；反之，其功能缺陷或基因突变则与同源重组缺陷（HRD）及癌症易感

别名

BRCA1/BRCA2 containing complex, subunit 5, BRCC 5, BRCC5, DNA repair protein RAD51 homolog 1, DNA repair protein rhp51, FANCR, hRAD51, HsRAD51, HsT16930, MRMV2, Rad 51, RAD51, RAD51 homolog, RAD51 homolog (RecA homolog, E. coli) (S. cerevisiae), RAD51 homolog A, RAD51 recombinase, RAD51, S. cerevisiae, homolog of, RAD51_HUMAN, RAD51A, RECA, RecA like protein, RecA, E. coli, homolog of

宿主; E.Coli

表达区间; 2-339

分子量; 38.7 kDa

标签; N-terminal His Tag

纯度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses

应用; Western Blot, ELISA

性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4

溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex

存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.

操作要点：

电泳条件‌：使用15% SDS-PAGE凝胶，以提高对小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。

‌转膜参数‌：采用湿转法，100 V、60–90分钟（4°C），使用PVDF膜（需甲醇预活化）。

‌抗体选择‌：

一抗：抗CST3多克隆抗体（如兔源抗体），推荐稀释比为1:1000。

二抗：HRP标记的山羊抗兔IgG，稀释比1:10,000。

‌显色方式‌：ECL化学发光法，预期条带位于‌~13.4 kDa‌处。

‌内参建议‌：由于CST3分子量较小，可选用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作为内参，避免条带重叠。

注意事项：

‌安全提示‌: 操作时需佩戴手套和护目镜，遵循实验室生物安全规范。

 安全提示：仅限研究使用，避免接触临床样本；操作时需佩戴防护装备。

质量控制：产品纯度通过SDS-PAGE验证，确保生物活性稳定；避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。

兼容性：适用于多种实验体系，但需优化浓度以避免非特异性结合。

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