Recombinant Human Rad1 新品

重组表达原理：

基因克隆‌：从牛基因组中获取CST3基因的编码序列（对应氨基酸31–148），插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。

宿主表达‌：将重组质粒转化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高，适合大规模生产。

蛋白纯化‌：利用His标签与镍柱亲和层析结合，实现高纯度（>95%）蛋白回收，再经透析或凝胶过滤去除杂质。

冻干保存‌：加入海藻糖作为保护剂，冻干后可长期稳定储存，复溶后保持天然构象和生物活性。

产品概述：

该蛋白通常为带有His等标签的融合蛋白，对应于人源RAD1基因编码的全长氨基酸序列，分子量约为30-35 kDa（具体大小取决于标签和表达系统）。Rad1是“9-1-1”细胞周期检查点复合物（由Rad9、Rad1和Hus1组成）的核心组分，该复合物结构与PCNA（增殖细胞核抗原）相似，作为DNA上的滑动夹，在DNA损伤修复和细胞周期检查点信号传导中发挥关键作用。在DNA损伤或复制压力下，Rad1被RAD17-RFC复合物加载到受损DNA位点，招募并增强DNA聚合酶β（POLB）、内切酶FEN1和DNA连接

产品名称; Recombinant Human Rad1

别名; Cell cycle checkpoint protein Hrad1, Cell cycle checkpoint protein Rad 1 A / B, Cell cycle checkpoint protein RAD1, Checkpoint control protein HRAD1, Checkpoint control protein RAD1, DNA repair exonuclease, DNA repair exonuclease rad1, DNA repair exonuclease rad1 homolog, DNA repair exonuclease REC1, DNA repair protein RAD1, EC 3.1.11.2, Exonuclease homolog RAD1, GTP-binding protein RAD, hRAD 1

宿主; E.Coli

表达区间; 1-282

分子量; 30.9 kDa

标签; N-terminal His Tag

纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE

应用; Western Blot, ELISA

性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4

溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex

存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.

使用前准备：

离心处理‌

冻干粉在运输过程中可能附着于管壁或管盖，开盖前应先进行离心，确保粉末沉降至管底。

建议条件：3000–3500 rpm 离心 5 分钟

若无高速离心机，可适当延长低速离心时间

平衡温度‌

将冻干粉缓慢恢复至室温（避免加热加速溶解），防止因温差导致管内冷凝水影响蛋白稳定性

溶解（Reconstitution）

溶解液选择‌

推荐使用无菌蒸馏水或 PBS（pH 7.4）进行复溶

若用于细胞实验，可选用含 0.1% BSA 的缓冲液以增强稳定性

配制浓度‌

将冻干粉溶解至终浓度 ‌0.1–1.0 mg/mL‌，此范围适用于大多数实验场景

浓度过高可能导致蛋白聚集，过低则易失活

混匀方式‌

使用移液枪头轻轻吹打数次，或上下轻柔颠倒混匀

严禁使用涡旋振荡器‌，以免破坏蛋白空间结构，导致活性丧失

公司正在出售的产品：

安全提示：仅限研究使用，避免接触临床样本；操作时需佩戴防护装备。

质量控制：产品纯度通过SDS-PAGE验证，确保生物活性稳定；避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。

兼容性：适用于多种实验体系，但需优化浓度以避免非特异性结合。