Recombinant Human PCNA 新品

重组表达原理：

基因克隆‌：从牛基因组中获取CST3基因的编码序列（对应氨基酸31–148），插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。

宿主表达‌：将重组质粒转化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高，适合大规模生产。

蛋白纯化‌：利用His标签与镍柱亲和层析结合，实现高纯度（>95%）蛋白回收，再经透析或凝胶过滤去除杂质。

冻干保存‌：加入海藻糖作为保护剂，冻干后可长期稳定储存，复溶后保持天然构象和生物活性。

产品概述：

Recombinant Human PCNA（重组人增殖细胞核抗原）是一种通过重组DNA技术（常在大肠杆菌或杆状病毒-昆虫细胞中）表达的人源蛋白。该蛋白分子量约36 kDa，由三个相同亚基组成环状三聚体，作为DNA聚合酶δ和ε的辅助因子，在真核细胞的DNA复制和损伤修复（如碱基切除修复、错配修复）中扮演核心的“滑动夹”角色，确保遗传信息传递的高效性与准确性。PCNA在细胞核内合成并主要定位于细胞核，其表达水平与细胞增殖活性密切相关，因此常被用作肿瘤研究中的增殖标志物。重组人PCNA蛋白通常带有His等亲和

产品名称; Recombinant Human PCNA

别名; ATLD2, cb16, Cyclin, DNA polymerase delta auxiliary protein, etID36690.10, fa28e03, fb36g03, HGCN8729, MGC8367, Mutagen-sensitive 209 protein, OTTHUMP00000030189, OTTHUMP00000030190, PCNA, Pcna/cyclin, PCNA_HUMAN, PCNAR, Polymerase delta accessory protein, Proliferating cell nuclear antigen, wu:fa28e03, wu:fb36g03

宿主; E.Coli

表达区间; 1-261

分子量; 28.6 kDa

标签; N-terminal His Tag

纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE

应用; Western Blot, ELISA

性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4

溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex

存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.

使用前准备：

离心处理‌

冻干粉在运输过程中可能附着于管壁或管盖，开盖前应先进行离心，确保粉末沉降至管底。

建议条件：3000–3500 rpm 离心 5 分钟

若无高速离心机，可适当延长低速离心时间

平衡温度‌

将冻干粉缓慢恢复至室温（避免加热加速溶解），防止因温差导致管内冷凝水影响蛋白稳定性

溶解（Reconstitution）

溶解液选择‌

推荐使用无菌蒸馏水或 PBS（pH 7.4）进行复溶

若用于细胞实验，可选用含 0.1% BSA 的缓冲液以增强稳定性

配制浓度‌

将冻干粉溶解至终浓度 ‌0.1–1.0 mg/mL‌，此范围适用于大多数实验场景

浓度过高可能导致蛋白聚集，过低则易失活

混匀方式‌

使用移液枪头轻轻吹打数次，或上下轻柔颠倒混匀

严禁使用涡旋振荡器‌，以免破坏蛋白空间结构，导致活性丧失

公司正在出售的产品：

安全提示：仅限研究使用，避免接触临床样本；操作时需佩戴防护装备。

质量控制：产品纯度通过SDS-PAGE验证，确保生物活性稳定；避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。

兼容性：适用于多种实验体系，但需优化浓度以避免非特异性结合。