Recombinant Human p27 KIP 1 新品

重组蛋白（Recombinant Protein）：

是指利用重组DNA或RNA技术，在体外人工制造的蛋白质。

这项技术通过将编码特定目标蛋白的基因片段，插入到重组表达载体中，然后导入宿主细胞（如细菌、酵母、哺乳动物细胞等），

利用宿主细胞的“蛋白质工厂”来生产出大量的、具有特定生物学活性的蛋白质。

产品概述：

人源重组p27 KIP1（Recombinant Human p27 KIP1）是一种在实验室中通过重组DNA技术表达的、与人体内天然p27蛋白结构一致的蛋白质。它由CDKN1B基因编码，是一种关键的细胞周期依赖性激酶抑制因子，主要通过与CDK2-cyclin E等复合物结合来抑制其活性，从而在G1期向S期转换的检查点处发挥“刹车”作用，负向调控细胞周期进程。研究表明，p27 KIP1在多种肿瘤中表达下调，其水平与肿瘤的恶性程度和预后密切相关，因此在肿瘤发生机制研究和药物开发中备受关注。

别名

AA408329, AI843786, Cdki1b, CDKN 1B, CDKN 4, CDKN1B, CDKN4, CDN1B_HUMAN, Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 1B, Cyclin dependent kinase inhibitor p27, Cyclin-dependent kinase inhibitor 1B, Cyclin-dependent kinase inhibitor 1B (p27, Kip1), Cyclin-dependent kinase inhibitor p27, Cyclin-dependent kinase inhibitor p27 Kip1, KIP 1, KIP1, MEN1B, MEN4, OTTHUMP00000195098, OTTHUMP00000195099, p27, p27 Kip1

宿主; E.Coli

表达区间; 1-198

分子量; 21.7 kDa

标签; N-terminal His Tag

纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE

应用; Western Blot, ELISA

性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4

溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex

存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.

 使用说明：

复溶方法‌: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液（pH 7.4）溶解冻干粉，轻轻混匀至完全溶解。

‌应用建议‌:

‌实验用途‌: 适用于Western Blot、ELISA等检测，作为抗原或标准品。

‌浓度调整‌: 根据实验需求稀释，避免高浓度导致非特异性结合。

‌安全提示‌: 操作时需佩戴手套和护目镜，遵循实验室生物安全规范。

重组表达原理：

基因克隆‌：从牛基因组中获取CST3基因的编码序列（对应氨基酸31–148），插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。

‌宿主表达‌：将重组质粒转化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高，适合大规模生产。

‌蛋白纯化‌：利用His标签与镍柱亲和层析结合，实现高纯度（>95%）蛋白回收，再经透析或凝胶过滤去除杂质。

‌冻干保存‌：加入海藻糖作为保护剂，冻干后可长期稳定储存，复溶后保持天然构象和生物活性。

公司正在出售的产品：

电泳条件‌：使用15% SDS-PAGE凝胶，以提高对小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。

‌转膜参数‌：采用湿转法，100 V、60–90分钟（4°C），使用PVDF膜（需甲醇预活化）。

‌抗体选择‌：

一抗：抗CST3多克隆抗体（如兔源抗体），推荐稀释比为1:1000。

二抗：HRP标记的山羊抗兔IgG，稀释比1:10,000。

‌显色方式‌：ECL化学发光法，预期条带位于‌~13.4 kDa‌处。

‌内参建议‌：由于CST3分子量较小，可选用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作为内参，避免条带重叠。

存储条件：

冻干状态‌: 存储于-20°C以下，可稳定保存长达12个月。

‌复溶后‌: 在2-8°C下可保存1个月，需保持无菌环境。

‌注意事项‌: 避免反复冻融，以防止蛋白降解或活性损失。